HBV-DNA

乙肝病毒的脱氧核糖核酸

HBV-DNA即是乙肝病毒的脱氧核糖核酸(即乙肝病毒基因)。 HBV-DNA是HBV感染最直接、特异性强和灵敏性高的指标,HBV-DNA阳性,提示HBV复制和有传染性。HBV-DNA越高表示病毒复制越厉害,传染性强。

概念
HBV-DNA即 乙肝病毒脱氧核糖核酸。病毒从结构上分为两类,一类是RNA病毒(核糖核酸病毒),另一类是DNA病毒(脱氧核糖核酸病毒),乙肝病毒属于后者。核酸是病毒的核心部分,病毒的基因都在这里,没有核酸,病毒就不能复制。不同于其他的生物体,病毒并不通过生长和分裂等方式繁殖自身,而是像铸造机器零件一样,按照一定的模具拷贝出来的。病毒DNA中包含有一些程序,指导病毒的遗传物质和其它一些结构蛋白组分增殖。另外,病毒DNA中还包含有一些信息,使得单一组分能够在细胞因子的帮助下,自发组装成新的病毒颗粒。
在医学上,病毒的繁殖被称之为“复制”,在复制的过程中,有两个很重要的因素:一个是催化剂,另一个是模板。没有这两个因素,乙肝病毒就不能复制。乙肝病毒复制的“催化剂”就是乙肝病毒DNA(即HBV-DNA)聚合酶。没有这种聚合酶的作用,乙肝病毒的复制就会停止。
HBV-DNA阳性从乙肝病毒定量上分析则通常说明乙肝患者体内的乙肝病毒数目超过了10的3次方,说明机体内含有大量的乙肝病毒,而且复制比较活跃,传染性较强,但是HBV-DNA阳性只是乙肝病毒定性检查的结果,与肝脏病变没有直接关系。
需要指出的是,HBV-DNA阳性的乙肝携带者未必需要治疗,还要结合转氨酶(ALT)水平。一般来说,只有当转氨酶大于正常值的2倍时,才应考虑治疗;HBV-DNA值的多少和肝损伤的程度没有直接的关系。乙肝大三阳携带者的HBV-DNA一般都比较高,但肝损伤未必就严重,因为乙肝病毒本身并不直接伤害肝细胞。
HBV-DNA定量检查就是检验乙肝病毒在血液中的含量。通过乙肝病毒含量的检测,可以了解患者体内的病毒含量,病情发展状况,对患者的治疗有很好的指导作用。
HBV-DNA定量检查的正常值是1000cps/ml。
当HBV-DNA定量检查值小于1000cps/ml时,表明体内HBV-DNA为阴性,传染力弱。
当HBV-DNA定量检查值大于1000cps/ml时,表明体内HBV-DNA为阳性,病毒仍然较多,传染力强。
检测意义
乙肝病毒检测有两个意义,一个是乙肝病毒DNA定性检测,一个是定量检测,另外还有一个是基因分析和耐药的变异检测,定性检测比定量要求高,这点在国内是比较忽视的。
还有定量的问题,强调用干扰素和核苷类似物进行抗病毒治疗,无论是哪一种药物的治疗,乙型肝炎病毒滴度和阴转都是考核抗病毒治疗的硬性指标,所以这项检测指标是非常重要的,而且在很多药物治疗过程中,乙肝病毒DNA下降的速度和幅度对于抗病毒治疗应达的疗效具有重要的预测价值,所以是非常重要的。第三点要对乙肝病毒进行基因分形和耐药变异问题测定,比如说有的病人服药之后从阴性转成阳性,还有乙肝病毒DNA的升高,这样的病人要充分重视是否产生了耐药变异,这个检测对医生更换药物或者更换治疗方案是非常有关系的。
检测报告
HBV-DNA的意义:主要是定性和定量。
定性,即确定是阴性还是阳性。乙肝病毒DNA的正常值为阴性,即乙肝病毒DNA<1x10的3次方拷贝/ml。定性测得的阳性通常说明病毒容易传染给他人,阴性说明不容易传给他人。对于乙肝大三阳来说,由于乙肝病毒e抗原(HBeAg)是阳性,所以乙肝病毒-DNA也是阳性的,表示乙肝病毒-DNA>1 x 10的3次方拷贝/ml ,这时体内的乙肝病毒复制活跃。
定量,即检测乙肝病毒在血液中的含量。定量检测结果主要是对抗病毒治疗提供检测和疗效参考。由于结果是数字的,而不是“高/低”、“阴/阳”、“正常/不正常”,所以看起来比较麻烦。确定正常值指标一定要知道所做实验的参考范围。参考范围因检测仪器、方法、试剂的不同而有差异。
重要性
HBV-DNA是判断乙肝病毒有无复制的“金指标”
HBV-DNA称为乙肝病毒脱氧核糖核酸。核酸是病毒的核心部分、病毒的基因都在这里,没有核酸,病毒就不能复制。因此,检测HBV-DNA是判断乙肝病毒有无复制的“金指标”。有人会问,检测乙肝“乙肝两对半”已能反映乙肝病毒有无复制、有无传染性,为何还要检测HBV-DNA呢?这是不是重复检查,增加了病人的负担? 可以肯定,检测HBV-DNA是必需的,不是重复检查,原因如下:
1.如果乙肝病人是“小三阳”,一般说这是乙肝病毒进入非复制状态,传染性消失或很低,病情也应当趋于稳定。但实际情况并非如此,有时病人的转氨酶仍然反复波动,甚至出现黄疽,这是怎么回事?经检测HBV-DNA发现其为阳性,可以肯定,病毒仍复制活跃、病情不稳定与乙肝病毒活跃有关。“小三阳”乙肝因其HBeAg阴性,被医生称为“HBeAg阴性肝炎”,是这由于病毒“变异”造成的,故也称“异型乙肝炎”。对此型乙肝不能掉以轻心,病情可能更重。
2.在检测病人“乙肝两对半”时,仅发现其中1项阳性,如HBsAg阳性或单一的抗—HBc阳性,这并不能说明病人体内的病毒有无复制,必需检测HBV-DNA,一旦阳性、就可肯定仍有病毒复制、也有传染性。
3.有一些肝炎病人的“乙肝两对半”5项全部阴性,甚至甲、丙、丁、成型肝炎病毒标志物也是阴性,但病人的转氨酶却很高,有黄疽,肝功能损伤明显、这是怎么回事呢?通过测HBV-DNA后,可能发现为阳性,就此可断定这种肝炎叫“慢性隐匿性乙肝”,在不明原因的肝炎中,此类型肝炎约占30一60%。
4.有的乙肝病人竟被检测到抗一HBs,这是保护性抗体,它的阳性说明感染结束,但为什么病人的病情依旧,并无好转迹象?如HBV-DNA阳性,问题又解决了,这叫“抗—HBs阳性乙肝”,也是病毒变异惹的祸。
HBV-DNA检查需要空腹吗
HBV-DNA是乙肝病毒存在的直接证据,HBV-DNA检查对于判断乙肝传染性强弱、乙肝病毒复制情况、乙肝抗病毒治疗效果等都有十分重要的意义,HBV-DNA检查为后期治疗提供了准确的参考依据,因此,HBV-DNA检查的应用越来越普遍,人们也越来越关注HBV-DNA检查。
HBV-DNA检查是不需要空腹的。但在观察乙肝抗病毒治疗效果时,除了检查HBV-DNA,还需要检查肝功能,检查肝功能是必须空腹的,因为肝功能检查多项内容测定值与饮食有一定关系,如饮酒易使某些血清酶值升高,进食油腻食物后可以使血脂增高等。因此,检查HBV-DNA也得空腹进行.
正常值
HBV DNA正常值是<10的3次方(或<1.0e+003拷贝/ML是正常值,此值仅供参考,以检测医院数据为准)。
注意事项
首先,HBV DNA检查的是乙肝病毒复制多少,DNA复制程度的大小并不代表肝脏实际损害的程度,DNA复制程度高,并非就代表损害严重。是否有损伤或损伤的程度请参考生化检查结果或肝活检的结果。
其次,HBV DNA检查分为定性检查和定量检查。HBV-DNA定性检查就是阴性或是阳性的结果。HBV DNA定量检查就是明确的数值,一般来说将HBV DNA低于1000copies/ml确定为阴性,但是因为采用的仪器和试剂不同,应该根据HBV-DNA检查化验单提供的正常参考值的范围来确定,而不能简单地一概而论。
第三,HBV DNA检查不需要空腹,也无特殊要求。
第四,HBV DNA定量检查精度非常高,但是准确性较差,一般只能精确到一个数量级上。所以乙肝患者在进行检查时,不能简单地按照一次的检查结果来判断病情,而应该将结合其它检查指标,综合多次HBV DNA定量检查结果进行判断。
第五,主要采用HBV DNA定量检查,但是只有大型医院才具有检查设备和技术,一些小的医院并不具备这样的条件的。乙肝检查要尽量去大医院检查,不要图便宜、图快。
临床意义
常规PCR法HBV-DNA检测的临床意义
常规PCR法HBV—DNA定量检测独特的诊断价值表现:
1、常规PCR法HBV-DNA检测施治前进行病毒定量检测,可以选择针对性的药品,避免盲目用药。
2、常规PCR法HBV-DNA检测施治后定量PCR可直接准确地测定体内病毒数量,有助于判断治疗乙肝的效果
3、常规PCR法HBV-DNA检测妊娠前进行定量PCR测定,有助于选择有益的妊娠机会。乙肝妊娠期的妇女进行定量PCR检查,有助于使部分患者得到及时、正确的诊断。
正确解读
HBV-DNA定量为4×10的5次方copies/ml,不能解释为血液中每亳升含有乙肝病毒40万个,拷贝数是利用DNA信号扩增技术,由计算机算出血液中乙肝病毒核酸的含量,拷贝数是一个分子生物定量单位,不是简单的数量单位。拷贝数高,说明病毒核酸含量高。
由于肝脏组织中的乙肝病毒每时每刻释放到血液中的数量都在变化之中,每天检测血液中的乙肝病毒核酸含量都不相同,不能简单用乙肝病毒核酸含量解释乙肝治疗效果。
另外乙肝病毒核酸的检测灵敏性高,特异性强,实验室及仪器设备要求较高,具备合格实验条件的实验室并不多,各实验结果不统一,没有可比性,这是在分析HBV-DNA定量结果时,必须加以考虑的问题。
阳性意义
HBV-DNA主要是检测血液中是否有乙肝病毒以及乙肝病毒的数量的。如果HBV-DNA阳性,表示血液中的乙肝病毒数量超过了HBV-DNA正常值1000copies/ml。
HBV-DNA是乙肝病毒复制的指标,阳性提示有乙肝病毒复制。HBV-DNA的含量高低,提示乙肝病毒复制是否活跃。实验室检测下限是500/ml。此项指标与乙肝五项,肝功能,肝胆脾B超,血常规等,作为乙肝患者和乙肝病毒携带者病情的主要参考指标,对于确定治疗计划以及评价疗效,尤其是抗乙肝病毒治疗,有重要意义。HBV-DNA越高表示病毒复制越厉害,传染性强。
治疗方法
HBV-DNA定量检测阳性说明体内存在病毒复制且传染性相对强。这种情况下,不论是乙肝大三阳还是乙肝小三阳患者,此时都需要进行抗病毒治疗。若乙肝患者肝功能正常,此时建议患者做肝穿刺检查,结果提示肝脏有炎症时也要进行抗病毒治疗,尤其是有肝癌家族史的患者,无论肝脏出现炎症,都需要进行治疗。
乙肝患者如果检查出HBV-DNA阳性,应该进一步检查肝功能、B超等。肝功能是衡量乙肝患者病情轻重的指标,B超检查结果可以看看该患者是否存在肝硬化迹象。如果HBV-DNA阳性患者的肝功能检查异常或者B超检查结果提示肝硬化,需要尽快进行治疗,防止病情进一步恶化。
检测区别
HBV-DNA与乙肝两对半检查区别一:检查对象不同
⑴HBV-DNA检查主要是对乙肝病毒的脱氧核糖核酸进行定性定量检查。HBV-DNA定性检查是检查HBV-DNA是阴性还是阳性,从而确定是否有感染性;HBV-DNA定量检查是检查患者带有HBV-DNA的数量(病毒载量),从而判定感染性的高低。
⑵乙肝两对半检查主要是指通过对乙肝表面抗原(HBsAg)、表面抗体(抗HBs或HBsAb)、e抗原(HBeAg)、 e抗体(抗HBe或HBeAb)、核心抗体(抗HBc或HBcAb)这五项指标的检测来检查是否感染乙肝及感染的具体情况,区分大三阳小三阳
HBV-DNA与乙肝两对半检查区别二:临床检测意义不同
⑴HBV-DNA检查对医生的诊断和用药非常重要,如果是阳性而且乙肝病毒载量很高,就须治疗。有的人因病情反复,可引起肝硬化;有的则因乙肝病毒DNA和人肝细胞的DNA发生整合,会促使癌变。因此HBV-DNA检查做为临床用药指导意义重大。
⑵乙肝两对半只能反映体内抗原抗体的携带模式及在一定条件下机体的免疫情况,为乙肝病毒感染提供间接证据。乙肝两对半的各项指标,具有的的临床意义也不同。例如:HBsAg(+)是乙型肝炎病毒感染的指标;HBeAg(+)是乙肝病毒在体内复制(繁殖)的指标,提示传染性较强;抗-HBc(+)提示体内存在HBcAg,是既往或现症感染乙肝病毒的标志。
结果分析
1、如果HBV-DNA定量检测结果小于1.0e3cps/ml,体内乙肝病毒数量极少,一般的实验室检测不出来。如果乙肝患者的肝功能正常、没有肝炎症状或者体征,可以暂时不用治疗,但需要定期检查肝功能、HBV-DNA等,发现病变及时治疗。
2、如果HBV-DNA定量检查结果大于1.0e3cps/ml,就说明患者体内有乙肝病毒,病毒复制活跃,有传染性。HBV-DNA定量检测值越大,体内病毒数量越多,病毒复制活跃。HBV-DNA定量检查结果大于1.0e3cps/ml、肝功能正常的乙肝患者,从理论上说,应密切关注病情变化,一旦肝功能异常就要及时治疗,否则对肝脏损伤很大。
检查周期
HBV-DNA检查是判断乙肝病毒在体内的数量,复制是否活跃,判断其传染性大小的重要指标。HBV-DNA检查对乙肝病情的监控、确诊、治疗有着重要的意义。HBV-DNA检测还可以判断患者是否需要接受乙肝抗病毒治疗。
而HBV-DNA多久检查一次应该根据乙肝患者的实际情况而定,不同的患者,由于病情的不同,乙肝病毒DNA检查的时间也是不同的,即使是同一个患者在不同病情阶段HBV-DNA多久检查一次的时间也是不同的。具体情况如下:
1、如果乙肝患者处于病毒的活动期,则需要1-2个月检查一次。
2、如果乙肝患者在接受乙肝抗病毒治疗,则需要至少3个月检查一次。
3、如果乙肝患者的病毒处于耐受期的话,一般3-6个月检查一次。
阴性传染
一般来说,HBV-DNA阳性表示乙肝病毒复制活跃,具有较强的传染性。HBV-DNA阴性,肝功能正常可以说明病情处于较为稳定的阶段,表示乙肝病毒复制不活跃,处于低复制或不复制的状态,相对的传染性就小很多,但是HBV-DNA阴性并不能说明不再传染了。只要乙肝患者体内有乙肝病毒的存在就有一定的传染性。
因此即使检查出来HBV-DNA阴性的乙肝患者,也要注意做好阻断传染的措施,提醒身边的家人朋友及时的接种乙肝疫苗来预防感染。
HBV-DNA阴性要治疗吗
HBV-DNA检测是乙肝定期检查项目之一,通过HBV-DNA检查可以知道患者体内的乙肝病毒数量,传染程度等等。HBV-DNA阴性只能说明乙肝病毒复制缓慢,乙肝病毒数量较少,但并不代表病情完全好了。只要患者体内还有乙肝病毒的存在,还是很容易导致病情恶化的。
HBV-DNA阴性并不能作为需不需要继续治疗的依据,还应根据肝功能、B超、肝脏影像学和病理学等相关检查结果来综合分析判断,如果肝脏影像学、病理学检查结果提示肝脏有损伤,特别是已有肝硬化或者肝纤维的倾向时,还需继续积极接受科学规范的治疗。
标本的采集
标本的采集可用于 HBV DNA PCR测定的临床标本很多,包括血清、血浆、活检组织、羊水、脑脊液、乳汁、胸腹水、组织蜡块等。最常用的血清和血浆,取材也较为方便。采血时,应注意以下几点:
①采用无菌试管或无菌真空采血管
②使用抗凝剂时,可使用EDTA或枸椽酸钠,不能使用肝素。另外,取血的量要准确,尤其是用于定量检测的标本;
③分离血清或血浆时,应采取相应的生物防护措施。存放血清或血浆样本管应无菌,并可以密闭保存。
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