三糖铁培养基

细菌培养基

三糖铁培养基是一种细菌培养基，主要是用来鉴别沙门氏与志贺氏菌属等肠道杆菌，主要成分包括有牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、乳糖、硫酸亚铁、氯化钠、硫代硫酸钠、酚红、琼脂、蒸馏水等。如同时含1%蔗糖，即成三糖铁培养基。

三糖铁培养基简介

1、用途：用以鉴别沙门氏与志贺氏菌属等肠道杆菌。

2、主要成分：有牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、乳糖、硫酸亚铁、氯化钠、硫代硫酸钠、酚红、琼脂、蒸馏水等。如同时含1%蔗糖，即成三糖铁培养基。

3、主要成分的作用：

①本培养基用以观察细菌对糖的分解能力及是否产生硫化氢，可初步鉴别细菌的类属。

大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖而产酸产气，使斜面与底层均呈黄色、且底层有气泡。伤寒杆菌、痢疾杆菌只能发酵葡萄糖而不分解乳糖，分解葡萄糖产酸使pH降低，因此，斜面和底层先都呈黄色，但因葡萄糖含量较少，所生成少量的酸可因接触空气而氧化，并因细菌生长繁殖较盛，分解氨基酸产生的碱性物质较多，致使斜面部分又变成红色；底层由于是在缺氧状态下，细菌分解葡萄糖所生成的酸类一时不被氧化而仍保持黄色。

②细菌若分解含硫氨基酸产生硫化氢，则与培养基中硫酸亚铁化合成黑色的硫化铁。

③硫代硫酸钠能防止硫化氢被氧化，而影响硫化铁的形成。

④酚红为指示剂，酸性时呈黄色，碱性时呈红色。

⑤若细菌具有动力，可在底层穿刺线四周出现扩散生长现象，无动力的细菌则仅在穿刺线上生长。

其他类型的培养基

肉汤培养基

1、用途：供血液、骨髓标本的增菌培养，亦适用于烧伤标本的细菌快速检验及一般菌的增菌培养。

2、主要成分：有水、蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、葡萄糖、枸橼酸钠、硫酸镁、青霉素酶、对氨苯甲酸、酚红溶液等。

3、各成分的作用：

①蛋白胨、牛肉膏：为主要氮源，供细菌合成菌体蛋白质，以供生长繁殖之用(亦可供给能量)，也有维持渗透压的作用。

②葡萄糖：为主要碳源，供给细菌新陈代谢活动所需要的能量。

③氯化钠：供细菌生长需要的无机盐，其作用为维持渗透压、构成菌体成分和酶的激动剂。

④枸橼酸钠：为抗凝剂，不使血液凝固成块，因此，可减少白细胞对病原菌的吞噬机会。

⑤对氨苯甲酸：能中和血中磺胺类药物的抑菌作用。

⑥硫酸镁：能破坏血中四环素、金霉素、土霉素、新霉素及多粘菌素等的抑菌作用。

⑦青霉素酶：可破坏青霉素。

⑧酚红：为指示剂，细菌生长后分解葡萄糖产酸，使培养基pH降低，酚红指示剂变黄，培养液呈黄色，即可知有细菌生长。

⑨水：是细菌的营养、代谢过程中不可缺少的物质，水又是良好的溶剂，培养基中的许多营养物质均须溶于水才能被细菌吸收。

伊红美蓝琼脂

1、用途：分离肠道致病菌。

2、主要成分：有无糖琼脂、乳糖、伊红和美蓝水溶液。

3、伊红、美蓝及乳糖的作用：伊红为酸性染料、美蓝为碱性染料，后者有抑制革蓝氏阳性细菌生长的作用，(但某些链球菌仍能生长)，同时也起着指示剂的作用。当大肠杆菌分解乳糖产酸，细菌处于酸性环境中，菌体带正电，易与酸性染料伊红结合，而伊红与美蓝又结合成1种复合物，故菌落不是红色而呈有金属光泽之紫红色。痢疾杆菌等不能分解乳糖，亦不产酸，伊红和美蓝不能结合，则细菌菌落为无色。绿脓杆菌、变形杆菌等有时可分解培养基中的蛋白胨而产碱，此时菌体带负电遂吸附美蓝使菌落着蓝色。由于这种培养基有鉴别某些细菌的作用，故称鉴别培养基。

SS琼脂

1、用途：是分离沙门氏菌属及志贺氏菌属的培养基。它对大肠杆菌有较强的抑制作用，而对肠道病原菌则无明显抑制作用，因此，可以增加粪便等标本的接种量，从而提高病原菌的检出率，它是目前公认比较满意的选择性培养基。

2、主要成分：有蛋白胨、肉膏、琼脂、煌绿、胆盐、硫代硫酸钠、枸橼酸钠、枸橼酸铁、乳糖、中性红、水等。

3、各成分主要的作用：

①肉膏、蛋白胨等为营养物质。

②枸橼酸钠、硫代硫酸钠、胆盐及煌绿等能抑制革蓝氏阳性细菌及大肠杆菌类细菌的生长。而胆盐又能促进沙门氏菌的生长。硫代硫酸钠能防止硫化氢被氧化，而影响硫化铁的形成。

③中性红为指示剂，酸性时呈红色，碱性时呈黄色。

④大肠杆菌能分解乳糖，而多数病原菌不能分解乳糖。由于大肠杆菌迅速分解乳糖而产酸，使胆盐呈胆酸析出，因而形成中心浑浊及指示剂变色而呈深红色菌落。沙门氏及志贺氏菌属，通常不分解乳糖而分解蛋白胨产生碱性物质，故呈现透明的微黄色菌落。某些变形杆菌及沙门氏菌之菌落中心可显黑色，因为这些细菌产生硫化氢与枸橼酸铁中的铁离子结合，形成黑色硫化铁。

⑤硫化硫酸钠有缓和胆盐对志贺氏菌及沙门氏菌的抑制作用，并中和煌绿、中性红等染料毒性，且能使大肠杆菌的红色菌落颜色更鲜明。

⑥SS琼脂是抑制能力强的选择性培养基，可以大量接种粪便标本。

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