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体外细胞转化试验

检测受试物对体外培养的哺乳动物细胞转化的遗传毒理试验

体外细胞转化试验是检测受试物对体外培养的哺乳动物细胞转化的遗传毒理试验。是将动物细胞在体外培养的环境下，将细胞暴露于致癌物，高度模拟致癌物在体内致癌的作用进行致癌物检测的一种技术，可以有效的体外筛查致癌物质的致癌活性。不仅可以检测具有遗传毒性的潜在致癌物，还可以检测非遗传毒性致癌物的致癌活性。体外细胞转化试验是以所培养的细胞发生恶性转化从而产生的形态改变为试验终点，可直接在体外观察并记录细胞由正常转化为具有肿瘤细胞性质的过程。

基本简介
体外细胞转化是多阶段的过程，具有致癌过程的某些特征，最终产生具有成瘤性和形态学异常的转化克隆。成纤维细胞体外转化克隆的表型改变主要有：在气管宿主的成瘤性、在半固体培养基中形成集落、细胞重叠成杂乱性生长等。
常用的细胞系
常用的细胞系有：
1）细胞株，叙利亚仓鼠胚胎细胞，最早应用的原代细胞系；
2）细胞系，C3H/10T1/2、BALB/C-3T3；
3）Bhas 42细胞系，将v-Ha-ras癌基因转染的BALB/c 3T3细胞，被认为是已经启动的了的细胞，可以直接检测促癌剂。
筛查
细胞转化试验方法最初建立的目的是从人类接触的日益繁多的化学品中筛选出具胡致癌活性的物质。早期方法仅能用于启动剂的检测，主要是基因毒性致癌物，后来发展起来的两阶段转化试验方法使其还可以应用于促癌剂的筛选，并得到广泛的应用。最典型的启动剂有3-甲基胆蒽（3-MCA）、N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）等，促癌剂有佛波酯（TPA）、冈田酸（OA）等。
结果判定方法
体外细胞转化试验是以细胞形态恶性转化为检测终点。对转化细胞的判定通常采用细胞灶法，计数克隆数，观察鉴定转化灶，单盲法观察，由2人共同认定。转化灶的判定标准采用“第二届全国细胞和组织培养专题研讨会”通过的鉴定指标：凡有50个以上聚集的细胞可认为是一个细胞灶。正常细胞灶,灶内细胞排列规则,束状,细胞灶外围区的细胞单层生长,规则。转化细胞灶,灶内细胞由正常的长梭形变为短梭状,失去接触抑制,呈复层生长,排列紊乱,形成交叉和旋涡。
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