体细胞克隆技术

生物技术

体细胞克隆技术是指把动物体细胞经过抑制培养，使细胞处于休眠状态。采用核移植的方法，利用细胞拆合或细胞重组技术，将卵母细胞去核作为核受体，以体细胞或含少量细胞质的细胞核即核质体作为核供体，将后者移入前者中，构建重组胚，供体核在去核卵母细胞的胞质中重新编程，并启动卵裂，开始胚胎发育过程，妊娠产仔，克隆出动物的技术，又可称之为体细胞核移植技术。

原理简介

体细胞克隆技术也即核移植技术。早在1950年，美国生物学家布格斯和金就开始了青蛙胚胎细胞的克隆研究。在1960年，英国生物学家格登利成功的用青蛙体细胞克隆出蝌蚪。1993年斯迪尔曼和赫尔报道在试管婴儿研究中，获得可分裂的但不能在体外存活的人类胚胎细胞。1997年2月英国罗斯林研究所的科学家成功的克隆了高等哺乳动物绵羊，诞生了克隆羊多莉。这一切在技术上为克隆人类自身铺平了道路。

详细内容

俄勒冈健康科学大学2007年曾成功制作了猴子的克隆ES细胞。关于人类的ES细胞，前韩国首尔大学教授黄禹锡曾在2004年宣布成功制作，但后被发现是假论文。当时，ES细胞曾被视为再生医疗的“王牌”。不过，2006~2007年京都大学教授山中伸弥研发了仅用体细胞进行基因操作的人工诱导多功能干细胞(iPS细胞)，再加上人类的ES细胞制作比其他哺乳类的困难许多等原因，ES细胞研究热潮逐渐降温。

如果使用患者的体细胞，就可以制作因基因相同而不会出现排异反应的治疗用组织。虽然卵细胞的提供是一大难题，但立花则指出：“比起iPS细胞来，克隆ES细胞也许较少出现基因异常。希望探讨两者的可能性，为再生医疗作贡献。”

研究小组经校内伦理委员会审批后，在美国国内总计接受了由共9名23岁~31岁的女性提供的126个卵细胞。研究小组将122个卵细胞去除细胞核，植入了他人皮肤细胞的细胞核，结果有21个发育到了被称为囊胚(Blastocyst)的阶段。取该组织的一部分进行培养，然后其中共6个成为了ES细胞。促使ES细胞分化成心肌后，研究小组还确认了脉动。此次成功制作的6个ES细胞中，有4个是由同一名女子提供的卵细胞制成的，它们似乎具有某种容易成为ES细胞的特质。

理论发展

克隆技术的发展，使科学家们拥有一件新的非常有效的工具，来深入研究重要的生命科学问题，包括各种疾病的发病机理、生物生长发育的机制、遗传和环境对生物的不同影响等等。再次，克隆技术将为动物遗传操作技术提供新途经，从而培育出优良的家畜、家禽,并克隆出生长快、抗疾病的转基因动物，生产重要的药物，或者为人类提供移植用的器官、组织和细胞。另外，克隆技术可以人为的保持人群中合理的性比，可以保存珍贵的少数民族遗传组成，可以增加对生理性状有益的基因在群体中的频率，可以为无精子患者产生自己的后代。

应用实例

2013年05月16日，美国俄勒冈健康科学大学研究员立花真仁等的研究小组在美国科学期刊《细胞》(Cell)网络版上发表文章，宣布已使用“体细胞克隆技术”，向女性提供的卵细胞内植入他人皮肤细胞的细胞核，首次成功制作了能够分化成各种组织的胚胎干细胞(ES细胞)。

2024年，江西农业大学猪遗传改良与种质创新全国重点实验室利用冷冻保存的白系五指山猪耳组织样品，通过细胞解离复活技术，结合核移植克隆技术，获得首批体细胞克隆猪16头（公猪11头、母猪5头），标志着因非洲猪瘟而遭受毁灭性影响的白色五指山猪得到群体性重现。

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