副溶血性弧菌

嗜盐性细菌

副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus），为革兰氏阴性杆菌，呈弧状、杆状、丝状等多种形状，无芽孢。

简介

副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus,VP）是一种嗜盐性细菌。副溶血性弧菌食物中毒，是进食含有该菌的食物所致，主要来自海产品，如墨鱼、海鱼、海虾、海蟹、海蜇，以及含盐分较高的腌制食品，如咸菜、腌肉等。本菌存活能力强，在抹布和砧板上能生存1个月以上，海水中可存活47天。临床上以急性起病、腹痛、呕吐、腹泻及水样便为主要症状。本病多在夏秋季发生于沿海地区，常造成集体发病。由于海鲜空运，内地城市病例也渐增多。

此菌对酸敏感，在普通食醋中5分钟即可杀死；对热的抵抗力也较弱。副溶血性弧菌食物中毒多发生在6~10月，海产品大量上市时。中毒食品主要是海产品，其次为咸菜、熟肉类、禽肉、禽蛋类，约有半数中毒者为食用了腌制品后。中毒原因主要是烹调时未烧熟煮透或熟制品被污染。

生物学特征

副溶血弧菌系弧菌科弧菌属，革兰染色阴性，兼性厌氧菌，为多形态杆菌或稍弯曲弧菌。本菌嗜盐畏酸。最适宜的培养基：温度为30℃—37℃，含盐2.5%—3%(若盐浓度低于0.5%则不生长），pH值为8.0—8.5。本菌对酸较敏感，当pH6以下即不能生长，在普通食醋中l一3min即死亡。在固体培养基上菌落常隆起，圆形，表面光滑，湿润。在3%一3．5%含盐水中繁殖迅速，每8～9min为一周期。对高温抵抗力小，50℃ 20 min；65℃ 5 min 或80℃ 1 min 即可被杀死。本菌对常用消毒剂抵抗力很弱，可被低浓度的酚和煤酚皂溶液杀灭。

临床表现

潜伏期自1小时至4天不等，多数为10小时左右。起病急骤，常有腹痛、腹泻、呕吐、失水、畏寒及发热。腹痛多呈阵发性绞痛，常位于上腹部、脐周或回盲部。腹泻每日3～20余次不等，大便性状多样，多数为黄水样或黄糊便。约2%～16%呈典型的血水或洗肉水样便，部分病人的粪便可为脓血样或粘液血样，但很少有里急后重。

由副溶血性弧菌引起的食物中毒一般表现为急发病，潜伏期2~24h，一般为10h发病。主要的症状为腹痛，优势腹痛在脐部附近剧烈。腹痛是本病的特点，多为阵发性绞痛，并有腹泻、恶心、呕吐、畏寒发热，大便似水样。便中混有黏液或脓血，部分病人有里急后重，重症患者因脱水，使皮肤干燥及血压下降造成休克。少数病人可出现意识不清、痉挛、面色苍白或发绀等现象，若抢救不及时，呈虚脱状态，可导致死亡。

由于吐泻，患者常有失水现象，重度失水者可伴声哑和肌痉挛，个别病人血压下降、面色苍白或发绀以至意识不清。发热一般不如菌痢严重，但失水则较菌痢多见。国内报道的副溶血弧菌食物中毒，临床表现不一，可呈典型、胃肠炎型、菌痢型、中毒性休克型或少见的慢性肠炎型型。本病病程自1～6日不等，可自限，一般恢复较快。

预防措施与其他细菌所致者似。

1、动物性食品应煮熟煮透再吃。

2、隔餐的剩菜食前应充分加热。

3、防止生熟食物操作时交叉污染。

4、梭子蟹、蟛蜞、海蜇等水产品宜用饱和盐不浸渍保藏（并可加醋调味杀菌），食前用冷开水反复冲洗。

来源和传播途径

分布极广，主要分布在海水和水产品中，我国华东地区沿岸的海水的副溶血性弧菌检出率为47.5%~66.5%，海产鱼虾的平均带菌率为45.6%~48.7%，夏季可高达90%以上。除了海产品以外，畜禽肉、咸菜、咸蛋、淡水鱼等都发现有副溶血性弧菌的存在。

海水是本菌的污染源，海产品、海盐、带菌者等都有可能成为传播本菌的途径，另外有肠道病史的居民、渔民带菌率偏高，也是传染源之一。

预防措施包括：动物性食品应煮熟煮透再吃；隔餐的剩菜食前应充分加热；防止生熟食物操作时交叉污染；海产品宜用饱和盐水浸渍保藏（并可加醋调味杀菌），食前用冷开水反复冲洗。

发病机理

吞服10万个以上活菌即可发病，个别可呈败血症表现。该菌有侵袭作用，其产生的TDH和TRH的抗原性和免疫性相似，皆有溶血活性和肠毒素作用，可引致肠袢肿胀、充血和肠液潴留，引起腹泻。 TDH对心脏有特异性心脏毒，可引起心房纤维性颤动、期前收缩或心肌损害。有人发现脲酶病腹泻有关。患者体质、免疫力不同，临床表现轻重不一，呈多型性。山区、内陆居民去沿海地区而感染者病情较重，临床表现典型；沿海地区发病者病情一般较轻。

流行病学

1、传染源传染源为病人，集体发病时往往仅少数病情严重者住院，而多数未住院者可能成为传染源，但由于病人仅在疾病初期排菌较多，其后排菌迅速减少，故不至因病人散布病菌而造成广泛流行。

2、传播途径本病经食物传播，主要的食物是海产品或盐腌渍品，常见者为蟹类、乌贼、海蜇、鱼、黄泥螺等，其次为蛋品、肉类或蔬菜。进食肉类或蔬菜而致病者，多因食物容器或砧板污染所引起。

3、地区分布特点：日本及我国沿海地区为副溶血性孤菌食物中毒发病率的高发区。据调查，我国沿海水域、海产品中副溶血性弧菌检出率较高，尤其是气温较高的夏秋季节。但近年来随着海产食品的市场流通，内地也有副溶血性弧菌食物中毒的散在发生。

4、季节性特点及易感性：7～9月常是副溶血性弧菌食物中毒的高发季节。男女老幼均可患病，但以青壮年为多，病后免疫力不强，可重复感染。

5、食物的种类：主要是海产品，其中以墨鱼、带鱼、虾、蟹最为多见，如墨鱼的带菌率达93%，其次为盐渍食品。食品中副溶血性弧菌的来源：人群带菌者对各种食品的直接污染。沿海地区饮食从业人员、健康人群及渔民副溶血性弧菌带菌率为11.7%左右，有肠道病史者带菌率可达31.6～88.8%。间接污染，沿海地区炊具的副溶血性弧菌带菌率为61.9%，被副溶血性弧菌污染的食物，在较高温度下存放，食用前加热不彻底或者生吃，或熟制品受到带菌者、带菌的生食品、带菌容器及工具等的污染。

PCR检测

用于检测V．p的PCR方法主要有任意引物PCR(abritrarilyprimedPCR，Ap-PCR)、针对任意引物PCR、多重PCR(muhiplex-PCR)、实时PCR(Real-timePCR)。 1、任意引物PCRMatsumoto等采用任意引物PCR对V．p进行检测。他们针对V。p的tdh基因和trh基因一段特异的序列，设计两条引物，

引物1：5--GGTGCGGGAA--3，

引物2：5一GTTTCGCTCC一3，

对1977～1998年所收集的227株V．p进行PCR。通过电泳分析发现，1996-1998年收集的22株血清型为03：K6菌株与1996年以前收集的03：K6血清型菌株基因序列有所不同，为03；K6血清型新出现的变异株，并最初出现在孟加拉国。这是目前最简单的以基因为基础的细菌亚分型方法。

2、针对任意引物PCR由于临床分离株绝大多数含有tdh基因，因此绝大部分研究者都根据tdh设计引物进行特异扩增。1993年，Lee等根据tdh基因设计引物，对36株TDH+株、89株TDH-株以及46株其他弧菌和肠道菌进行PCR检测。结果显示，36株TDH+株全部特异扩增出来，其余菌株都没有扩增；而检测灵敏度高，最低检测量可至40pgDNA，并可直接检测粪便标本，无需分离培养，方便快速。1999年，Kim等选择toxR基因序列设计两对引物，5’--GTCTTCTGACGCAATCGTTG--3和5’一ATACGAGTGGTTGCTGTCATG一3’，对14株V．p、14株其他弧菌进行PCR。结果显示，14株V．p都得到一条368bp的特异扩增亮带，而其他菌株没有特异扩增。此外，Venkateswaran等选择gyrB基因设计引物对V·p进行PCR、Cordova等选择pR72H基因设计引物进行PCR，特异性、灵敏度都很好。

3、多重PCR由于不是全部副溶血性弧菌都含；tdh基因或，trh。基因，所以只针对tdh或trh的单一PCR，有时会漏检。多重PCR(multiplex-PCR)能全方位高效率地检测Vpo1994年，Bej白等针对“、tdh、trh设计不同的引物对，在同一PCR反应体系内同时扩增tl、tdh、trh。结果显示，所有的V。p都扩增出“基因，tl基因是V．p特异的；54%的V．p扩增出tdh基因；只有38．73%的V．p扩增出trh基因；该法灵敏度高，能把log牡蛎培养肉汤里10～100个V．p检测出来。与其他常规生化方法相比，多重PCR更快速，仅8h就能完成检测，结果更为准确、可靠，而且还可改进成定量竞争PCR，对标本中靶序列进行定量。

4、实时PCR常规PCR检测，需要从反应体系中吸取产物做电泳或Southern杂交等试验进行鉴定，转移过程中易污染，造成假阳性，而且耗费时间。1996年，Tyagi开创了一种实时PCR(Real-timePCP,)。实时PCR是在，PCR反应体系中加入标记有报告基团和淬灭基团的线性Taqman。探针或茎环型荧光分子信标探针，在墓因扩增过程中，与产物杂交，此时，报告基团和淬灭基团分开，根据能量共振转移现象，报告基团发出荧光而被检测。这种方法操作简单，闭管检测，减少污染，灵敏度高，并且可以在PCR结束或PCR过程进行同步定性或定量检测，面且可以进行临床大规模快速检测。

治疗措施

1、支持及对症治疗脱水者需输入生理盐水及葡萄盐水，或口服补液盐，以纠正失水。血压下降者，除被动补充血容量，纠正酸中毒等外，可酌用血管活性药。

2、抗菌药物轻度患者可不用抗菌药物，较重者可给复方新诺明或庆大霉素、阿米卡星和诺氟沙星等喹诺酮类抗菌药物【上述抗生素类可能使细菌产生耐药性，使用须谨慎】。

3、发生中毒后要立即停止食用可疑中毒食品，并到医院医治。副溶血性弧菌对氯霉素敏感。呕吐、腹泻严重者要补充水和盐。

中毒预防

加工海产品的案板上副溶血弧菌的检出率为87.9%。因此，对加工海产品的器具必须严格清洗、消毒。海产品一定要烧熟煮透，加工过程中生熟用具要分开。烹调和调制海产品拼盘时可加适量食醋。食品烧熟至食用的放置时间不要超过4个小时。主要病理变化为空肠及回肠有轻度糜烂，胃粘膜炎、内脏（肝、脾、肺）淤血等。

辅助检查

1、白细胞计数总数多在1万mm3以上，中性粒细胞偏高。

2、便检查镜检可见白细胞或脓细胞，常伴有红细胞，易被误诊为菌痢。粪便培养可检出副溶血弧菌，绝大多数迅速转阴，仅少数持续阳性2～4天。