尿液分析仪

测定尿中某些化学成分的自动化仪器

尿液分析仪是测定尿中某些化学成分的自动化仪器，它是医学实验室尿液自动化检查的重要工具，具有操作简单、快速等优点。仪器在计算机的控制下通过收集、分析试带上各种试剂块的颜色信息，并经过一系列信号转化，最后输出测定的尿液中化学成分含量。

基本结构

尿液分析仪一般由试带、机械系统、光学系统、电路系统、输入输出系统等部分组成。

1. 试带

试带上有数个含有各种试剂的试剂垫，各自与尿中的相应成分进行独立反应后可呈现不同颜色，颜色的深浅与尿液中待测成分呈比例关系。不同类型的尿液化学分析仪开发有适合自己使用的配套试带。试带采用多层膜结构：第一层尼龙膜起保护作用，防止大分子物质对反应的污染，保证试带的完整性；第二层绒制层，它包括过碘酸盐区（有些试剂模块含有此区）和试剂区，过碘酸盐区可破坏维生素C的干扰物质试剂区含有试剂成分，主要与尿液待测成分发生化学变化，产生颜色变化；第三层是吸水层，可使尿液均匀快速地渗入，并能抑制尿液流到相邻反应区；最后一层塑料片作为支持体）。各试剂块与尿液中被测定成分反应而呈现不同颜色。通常试带的试剂块要比分析仪测试项目多一个空白块。以消除尿液本身的颜色及试剂块分布的状态不均等所产生测试误差，提高测量准确度。

2. 机械系统

机械系统主要功能是将待检的试带和待检标本传送到检测区，分析仪检测后将试带排送到废物盒。不同型号的仪器采取不同的机械装置，如齿轮组合、传输胶带、机械臂、吸样针、样本混匀器等。

3. 光学系统

光学系统一般包括光源、单色处理器和光电转换三部分。光线照射到反应物表面产生反射光，反射光的强度与各个项目的反应颜色成比例关系。不同强度的反射光在经光电转换器转换为电信号并送到放大器进行处理。

尿液分析仪的光学系统通常有3种：发光二极管（LED）系统、滤光片分光系统和电荷耦合器件（CCD）系统。

4. 电路系统

电路系统将转换后的电信号放大，经模数转换后送中央处理器（CPU）处理，计算出最终检测结果，然后将结果输出到屏幕显示并送打印机打印。CPU的作用不仅是负责检测数据的处理，而且要控制整个机械系统和光学系统的有机运行，并通过软件实现多种功能。

5. 输入输出系统

由显示器、面板、打印机等部件组成。用于操作者输入标本信息、观察仪器工作状态、打印报告单等功能。

工作原理

尿液分析仪测试原理的本质是光的吸收和反射。将液体样品直接加到已固化不同试剂的多联试剂带上，尿液中相应的化学成分使多联试剂带上含各种特殊试剂的模块发生颜色变化，颜色的深浅与尿样中特定化学成分浓度成正比；将多联试带置于尿液分析仪比色进样槽，各模块依次受到仪器光源照射并产生不同的反射光，仪器接收不同强度的光信号后将其转换为相应的电信号，再经微处理器（CPU）计算出各测试项目的反射率，然后与标准曲线比较后校正为测定值，最后以定性或半定量方式自动打印出结果。

此类仪器一般用电脑来控制，采用球面积分仪接受双波长反射光的方式测定试带上的颜色变化进行半定量测定。试剂带上有数个含各种试剂的试剂垫，各自与尿中相应成分进行独立反应，而显示不同颜色，颜色的深浅与尿液中某种成分成比例关系，试剂带中还有另一个“补偿垫”，作为尿液本底颜色，对有色尿及仪器变化所产生的误差进行补偿。

将吸附有尿液的试剂带放在仪器比色槽内，试剂带上已产生化学反应的各种试剂垫被光源照射，其反射光被球面积分仪接收，球面积分仪的光电管被反射的双波长光（通过滤片的测定光和一束参考光）照射，各波长的选择由检测项目决定。

仪器通常按下列公式自动化计算出反射率，然后与标准曲线比较，自动找印也各种成分的相应结果，尿液中某种成分含量高，其相应试剂垫的反射光较暗，否则较强。

反射率分式：R（%）=Tm.Cs/TsCm×100%

式中的R（%）为反射率；Tm为试剂垫对测定波长的反射强度；Ts为试剂垫对参考波长的反射强度；Cm为较准垫对测定疵长的反射强度；Cs为校准对参考波长的反射强度。

临床应用

尿检的重要意义在于通过了解泌尿系统的生理功能、病理变化，可以间接反映全身多脏器及系统的功能。

分类

1. 按工作方式分类：

湿式尿液分析仪和干式尿液分析仪，其中干式尿液分析仪因其结构简单、使用方便，临床普遍使用。

2. 按测试项目分类：

（1）8项尿液分析仪：检测项目包括尿蛋白（PRO）、尿糖（GLU）、尿PH、尿酮体（KET）、尿胆红素（BIL）、尿胆原（URO）、尿潜血（BLD）、尿亚硝酸盐（NIT）。

（2）9项尿液分析仪：8项+尿白细胞（LEU）。

（3）10项尿液分析仪：9项+尿比重（SG）。

（4）11项尿液分析仪：10项+维生素C。

（5）12项尿液分析仪：11项+颜色或浊度。

3. 按自动化程度分类：

（1）半自动化尿液分析仪：按其检测项目可分为尿8项、尿9项、尿10项、尿11项、尿12项。

（2）全自动化尿液分析仪：按其检测项目可分为尿10项、尿11项、尿12项。

检测方法

1. 尿PH检查

结果有二重含义：①反映体内酸碱代谢状态；②由于尿蛋白、尿比密的测定原理是基于模块上最后PH试剂的颜色变化，因此分析PH变化还有监控尿PH变化对其它模块区反应的干扰作用。

2. 尿比密检查

尿比密测定曾采用悬浮法和折射仪法，主要测定尿内固体物浓度随着10项尿液分析仪的问世，试带法测定尿比密得到广泛使用，其膜块中主要含有多聚电解质（甲乙烯酸酰马不酐）、酸碱指示剂及缓冲物，这是采用酸砖瓦指示剂法，其原时是根据经过多聚电解质的Pka改变与尿液离子浓度相关原理。麻剂条中的多聚电解质含有随尿标本中离大浓度则解离的酸性基团，离子越多，酸性基团解离子越多，而使模块中的PH改变，这种改变可由膜块中的酸碱性指示剂的颜色变化显示出来，进而换算成尿液的比密值。

3. 尿蛋白检查

尿液分析仪尿蛋白测定是根据指示剂蛋白误差原理，膜块中主要含有酸碱性指示剂枣溴酚兰、枸橼酸缓冲系统和表南的活性剂。在PH3.2时，溴酚产生的阴离子，与带阳离子的蛋白质（白蛋白）结合后发生颜色变化。　干化学法测定尿蛋白操作简单快速，但在使用应注意：①病人服用奎宁和磺胺嘧啶等药物引起的强碱性尿时''会使干化学法出现假阳性结果而磺基水杨酸法出南假阴性结果.可用稀乙酸将尿液PH调5-7''再行实验''借以区别是否由于强碱性尿而导致假阳性.②研究证明几十种药物可使尿蛋白检查出现假阳性''有学者对用大剂量青霉素双缩脲定量可以对白蛋白，球蛋白显示出敏感性，而干化学测量球蛋白的敏感性仅是白蛋白的1/100-1/50。因此对于肾病患者特别是在疾病发展过种中需在系统观察尿蛋白含量的病例应使用磺基水杨酸法（或加热乙酸法）定性和双缩脲法进行定量试验。④标本内含有其它分泌物（如生殖系统分泌物）或含有较多细胞成分时，可引起假阳性。建议以磺基水杨权法作为干化学检测尿蛋白的参比方法。

4. 尿葡萄糖测定

尿试带法测定尿葡萄糖是采用酶法。其膜块中含有葡萄糖氧化酶、过氧化物酶和色原。不同厂家采用的色源有异主要有二类：①采用碘化钾做色原，阳性反应呈红色；②采用邻甲联苯胺作色原，阳性反应呈蓝色。其测定原量是葡萄糖氧化酶把葡萄糖氧化成葡萄糖醛酸和过氧化氢，后者再由过氧化物酶催化释放出，而使色原呈颜色，以此类方法最常用。　尿试带法在使用中应注意：①尿试带法与班氏定性法的特异性不同前者的特异性强，吸与葡萄糖反应；而后者与尿内反有不原性糖和所有还原性物质都反应，故在尿试带法呈阴性的标本有可能在班氏法呈阳性结果；②干化学法与班氏法的灵敏度不同，干化学法的灵敏度高，葡萄糖含量为1.67-2.78mmol/L时即可出现弱阳性；而班氏法8.33mmol/L才呈弱阳性表现；③干扰物质对两法的影响不同：尿液内含有对氧亲和力较强的还原物质可与班氏法中的铜离子作用产生假阳性，但却可使干化学法试带产生的H2O2还原显色而使其成假阴性。排除的方法是先将尿液煮沸几分钟破坏维生素C再进行实验。现已有含维生素C氧化酶的试带的可以排除这一干扰。④干化学法测定尿葡萄糖只是一般的半定量试验，它所设计的浓度水平与传统的班氏存在的着差异，二者有可相互比；因此对于糖尿病的动态观察，在干化学出现阳性结果时，最好用湿化学定量方法，以确立准确的尿葡萄糖范围或收集昼夜尿标本作尿糖定量。

5.尿酮体检查

检测尿酮体的膜块中主要含有亚硝基铁氰化钠，或与尿液中的乙酰乙酸、丙酮主生紫色反应。其对乙酰乙酸的敏感性为50-100mg/L对丙酮则为400-700mg/L，不与β-羟丁酸起反应。　在使用中就注意：①由于尿酮体中的丙酮和乙酰乙酸都具有挥发性，酰乙酸更易受热妥解成丙酮；尿液被细菌污染后，酮体消失，因此尿液必须新鲜，及时送检，以免因酮体的挥发或分解出现假阴性结果或结果偏低；②干学法与酮体粉法灵敏度存在差异：酮体粉法对乙酰乙酸与丙酮的敏感性分别为80mg/L和100mg/L。不如试带法敏感，故同一病理标本两面种方法可能出现结果的差异，分析结果时应特别注意；③不同病因引起的酮症，酮体的成分不同，即使一病人不同病程也可有差异，例如在糖尿病酮症酸中毒早期病命名中，主要酮体成分β羟丁酸，很少或缺乏乙酰乙酸，此时测得结果可导致对总酮体量估计不足。在糖尿病酮症酸中毒症状缓解之后，β-羟丁酸转变为乙酰乙酸，反而使乙酰乙酸含量比初始急性期增高，易对病情估计过重。因此检验人员必须注意病程发展，与临床医生共同分析实验结果。

6.尿胆红素、尿胆原检查

尿胆红素测定原理是结合胆红质在强酸性介质中，与2，4-二氯苯胺重氮盐起偶联反应呈紫红色；测定尿胆原的原理与改良Ehrlich法相同。　两个方法主要注意点为：①标本必须新鲜，以免胆红素在阳光照射下成为胆绿素；尿胆原在氧化成尿胆素。②尿液中含高浓度维生素C和亚硝酸盐时，抑制偶氮反应使尿胆红素呈假阴性。当患者接受大量的氯丙嗪治疗或尿中含有盐酸苯偶氮吡啶的代谢产生时，可呈假阳性。③尿液中一些内源物质如胆色素原、吲哚、胆红素等可使尿胆原检查结果出现阳性，一些药物也可产色干扰实验。④正常人尿胆原排出理每天波动很大，夜间和上午量少，午后则迅速增加，在午后2-4时达最高峰；同时尿胆原的清除率与尿PH相关，PH5.0时，清除率为2ml/min;Ph8.0时增加至25ml/min，因此有学者倡用预先给予患者服用碳酸氨钠，以碱化尿液慢集午后2-4时尿（2小时排出量）进行测定，以提高检出率。

7.尿亚硝酸盐检查

膜块中主要含有对氨基苯砷酸和1，2，3，4-四羟基对苯喹啉-3酚。大多当数尿路感染由大肠埃希菌引起的，正常人尿液中含有来自食物或蛋白质代谢产生的硝酸盐，池尿液中有大肠埃希菌感染增殖时，将硝酸盐还原为亚硝酸盐，可将膜块中对氨基础苯砷酸重氮化而成重氮盐，后者与1，2，3，4-四羟基对苯喹啉-3鞭偶联使膜块产生红色，借以诊断患者是否被大肠埃希菌感染，其检出敏感度为0.03-0.06g/l 。尿液中亚硝酸盐检出率受感染细菌是否含有硝酸盐还原酶，食物中是否含有选题的硝酸盐、尿液标本是否在膀胱停留4小时以上三者影响，符合上述三个条件，此试验的检出率为80%，反之可呈现阴性结果。因此本试验阴性关不能排除细菌尿的可能，以样亚硝酸盐试验阳性也不能完全肯定泌尿系统感染，标本放置过久或污染可呈假阳性，应结合其它尿液分析结果，综合分析得出正确的判断。

8.尿白细胞检查

尿试带法检查尿内白细胞的原理基于中性粒细胞胞质内含有特异性酯酶，可或作用于膜块中的吲哚酚酯，关与重氮盐反应形成紫色缩合物，其颜色深浅与中性粒细胞的多少呈正比例关系。操作时应注意：①尿液标本必须新鲜，留尿后应立即测定，以免白细胞契坏，导致干化学法与镜检法人为的实验误差；②此法只能测中性粒细胞，不与单核细胞、淋巴细胞反应，在肾移植病人发生排异反应时，尿中的以淋巴细胞为主的或其它病因引起的单核细胞尿时会产生阴性结果；③尿液中污染甲醛或含有高浓度胆红素或使用某些药物时，吉产生假阳性；尿蛋白>5g/L或尿液中含有大剂量先锋霉素等红物时，可便结果偏低或出现假性结果。　由于尿液分析仪白细胞检测与显微镜下计数实验原理截然不同，其报告方式也是两种不同的概念，很难找出两者的对应关系，迄今还没有一种直接的换算方式，因此仪器法白细胞检查只是一个筛选试验，绝不可代替显微镜检查。

9.尿血红蛋白、尿红细胞检查

膜块中主要含有过氧化氢茄香素或过氧化氢烯钴和色原（如邻甲联苯胺）两种物质。其原理为尿液中红细胞内的血红蛋白或其破坏释放出的血红蛋白均具有过氧化氢酶样活性，可使过氧化氢茄香素或过氧化氢烯钴分解出，后者能氧化有关色原（如邻甲联苯胺）使之呈色。　尿试带法检查尿内红操作时应注意：①因为不同厂家或不同型号的试剂带敏感度不同，使用时必须注意批间差；②干化学法既可与完整的红细胞应应又能与游离的血红蛋白反应，因此报告时要了解临床诊断，综合分析。由于肾病患者终尿中的红细胞可因各种因素变形裂解使血红蛋白逸出，可导致仪器法与水测法的差异；③尿中含有的易热酶、肌红蛋白或菌尿可引起假阳性；④大量维生素C可干扰试验结果，使某些试带产生假阴性，应予以警惕

结果分析

不同的干扰因素对上述三种方法的测量的比密结果影响也不同：

第一是尿液中的非离子化合物增多时，可使悬浮法和折射仪法测得的比密结果偏高，而试带法只与离子浓度有关，不受其影响；

第二是尿液中蛋白增多时，三种方法都具有不同程度的增高，以试带法最为明显，折射仪法次之；

第三是试带法易受PH的影响，当尿液的PH>7时应在测定结果的基础是增加0.005作为由于尿液PH损失的补偿。

使用方法

以半自动仪为例：

注意事项

维护与保养

尿液化学分析仪是一种精密的电子光学仪器，必须精心维护，仪器应避免阳光长时间的照射及温度过高、湿度过大。不规范地操作仪器，会扰乱仪器的正常工作，引起不良结果。

保养

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