应用物理或化学方法，除掉或抑制血液中的某些凝血因子，阻止血液凝固，称为抗凝。能够阻止血液凝固的化学试剂或物质，称为抗凝剂或抗凝物质。 如天然抗凝剂（肝素，水蛭素等） Ca2+螯合剂（柠檬酸钠，氟化钾）。
种类
乙二胺四乙酸盐类
乙二胺四乙酸（EDTA）盐有二钠、二钾和三钾盐。均可与钙离子结合成螯合物，从而阻止血液凝固。
EDTA盐对红、白细胞形态影响很小，根据国际
血液学标准公委员会（International committee standard of hematology ,ICSH）1993年文件建议，血细胞计数用
EDTA二钾作抗凝剂，用量为EDTA-K2.2H2O1.5-2.2MG （4.45±0.85μmol）/ml血液。EDTA-
NA与EDTA-K2对
血细胞计数影响均较小，但二钠溶解度明显低于二钾，有时影响抗凝效果，其他抗凝剂不适合于血
细胞计数。表1-1是几种抗凝剂对白细胞计数的影响，EDTA影响小板聚集，不适合于作凝血项检查和
血小板功能试验。
草酸钠
草酸
钠（sodium oxalate）
草酸盐可与血中钙离子生成草酸钙沉淀，从而阻止血液凝固。
肝素类
肝素（heparin）肝素广泛在于肺、肝、脾等几乎所有组织和血管周围
肥大细胞和
嗜碱性粒细胞的颗粒中。它是一种含硫酸基团的
粘多糖，是分散物质，
平均分子量为15000（2000-40000）。肝素可加强抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）灭活
丝氨酸蛋白酶，从而具有阻止凝血酶形成，对抗凝血酶和阻止血小板聚集等多种作用。每毫升血液抗凝需要肝素15±2.5IU 。尽管肝素可以保持红细胞的
自然形态，但由于其常可引起白细胞聚集关使用涂片在
罗氏染色时产生蓝色背景，因此肝素抗凝血不适全血液学
一般检查。肝素是红细胞透渗脆性试验理想的抗凝剂。
枸橼酸钠
枸橼酸钠（trisodium citrate）枸橼酸盐可与血中钙离子形成可溶性螯合物，从而阻止血液凝固。
枸橼酸钠有2Na3C6H5O7和2Na3C6H5·11H2O等多种晶体。通常用前者配成109mmol/L（32g/L）水溶液（也有用106mmol/l浓度），与血液按1：9或1：4比例使用。枸椽钠对凝血V因子有较好的保护作用，使其活性减低缓，故常用于凝血象的检查，也用于
红细胞沉降率的测定。因毒性小，是输积压保养中的成分之一。
临床应用
EDTA
EDTA是临检工作中最常用和最重要的抗凝剂和试剂之一，其机制是通过与水相中的
钙离子形成稳定的
螯合物而阻止
血液凝固。EDTA的
盐类有钾、钠、
锂盐、均溶于水，
钾盐较钠盐的
溶解度大，全血胞计数最好使用EDTA的钾盐。EDTA能影响某些酶的活性和抑制
红斑狼疮因子，故不适于制作组化染色和检查
红斑狼疮细胞的
血涂片。EDTA还会影响
血小板聚集和
白细胞吞噬功能，也不适于做止血学检验和
血小板功能检验。用EDTA
抗凝血制备的
涂片对
粒细胞形态有影响，其影响程度与抗凝血放置时间和抗凝剂浓度有关。按照
ICSH建议EDTA的使用浓度为1.4～1.6g/L血液，迅速制备涂片，粒细胞
形态特征有微小的改变，有时
细胞核分叶不见，
细胞肿胀。如果用放置时间较长的血液制备的涂片可出现细
胞浆内颗粒消失，胞浆和细胞核有空泡，
染色质模糊不清。用大于1.5g/L血液浓度制备的血涂片，粒细胞可完全变性，对
淋巴细胞和
单核细胞也有影响，尤其是血小板，可出现肿胀、破裂而产生碎片，影响其计数，造成结果偏高。获得血浆标本可通过不同的抗凝剂，肝素锂作为抗凝剂在国外应用广泛，而国内多使用
肝素钠、EDTA-K2抗凝，与国外有所不同。随着
临床医学的发展，近年来
糖化血红蛋白检测项目的开展，也使用了EDTA-K2作为抗凝剂，从而减少了对结果的影响。
肝素
肝素是血液
化学成分测定中最好的抗凝剂。肝素是一种含
硫酸基团的
黏多糖，分子量为1.5万，其抗凝机制是与抗凝酶Ⅱ一起，在低浓度能抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之间的作用，并能加强
抗凝血酶Ⅲ灭活丝氨酸蛋白酶，从而阻止
凝血酶形成；还有抑制凝血酶的自我催化及抑制因子X的作用。肝素的盐类有钠、锂、
铵盐。通常用肝素抗凝的剂量是10.0～12.5IU/mL血液。临床常用肝素锂，虽其价格较贵，但抗凝效果较好。因为肝素钠能增加血浆钠的含量，而肝素铵能增加
尿素氨的含量。某些生化成分在血清和肝素抗凝的血浆中有明显的区别。在
凝血过程中由于
红细胞的溶解破坏使
血清钾的
含量比血浆为高，由于血浆中含有Fg，其含量比血清高。因此，测定
钾离子时，注意血清与血浆之间的差异。另外
肝素过量可引起
白细胞聚集和
血小板减少，故不适于
白细胞分类和
血小板计数，更不能用于止血学检验。通过试验表明，采血时加入肝素钠抗凝剂后，对测定血液中
总蛋白质含量结果有较明显的影响，会使其测得结果高于用血清测得总
蛋白质3%～5%。但加入了抗凝剂后，其总蛋白含量低于血清总
蛋白质含量，其原因是血液加入
肝素钠抗凝剂后，阻断了
凝血活酶的生成，阻止了血液凝固，导致
纤维蛋白原不能水解转化成
纤维蛋白单体，有效阻止了纤维蛋白单体的形成，这些纤维蛋白原仍留在血浆中。而血清是血液经凝固后，纤维蛋白原水解转化为纤维蛋白单体，并因凝固而消耗，离心后随
血细胞一并分离出去了。因此，血浆中的总蛋白质量是包含了纤维蛋白原在内的所有蛋白质，而血清中是不含有纤维蛋白原的总蛋白质含量，理论上应该低于血浆中的总蛋白含量。因此在进行血液总蛋白质
含量测定时，最好以血清为标本，对一些急诊标本，或是一些因其他原因急需测定的患者，需要用血浆做标本测定总蛋白时，在测出总蛋白后，应扣除纤维蛋白原的含量（一般扣除3%～5%），这样才能与以血清为标本测得的总蛋白含量一致，真实反映患者体内实际总蛋白质之含量。
枸橼酸盐
枸橼酸盐主要用于止血学检验及血沉的测定。因其毒性小，也用于输血
保养液中。其抗凝机制是
枸椽酸盐与血中钙离子形成可溶性螯合物，从而阻止血液凝固，其反应式为Na3C6H5O7+Ca2+→CaC6H5+3Na+。其盐类主要是钠盐。枸缘酸钠有Na3C6H5O7ZH5O和2Na3C6H5O7+1H2O2种
晶体，通常用前者配制0.129
mol/L（3.8%）或0.109mol/L（3.2%）的血溶液，与血液按1:9使用。对于用于监测口服华法林等抗凝剂治疗的患者，测定
PT、
APTT所用的枸缘酸钠浓度（3.2%或3.8%）不应随意改变，因为可能影响到
国际标准化比值（INR）。一般用浓度0.129mol/L的枸缘酸钠比用0.109mol/L浓度时INP值要高些，另外对不同来源的凝血活酶试剂，对同一正常人或患者血浆的
凝固时间可以相差很大。因此每个实验室所使用的凝血活酶试剂的来源应尽可能恒定，配制操作方法应规范化，否则会使凝固时间延长或缩短，或使正常值无
规律性。有条件的实验室可采用缓冲抗凝剂，这种试剂对标本经
冷冻保存后再进行分析更为适宜。
缓冲剂的作用是维持血浆恒定pH值，防止易变因子
失活。
配制
乙二胺四乙酸盐配制
常用EDTA的钠盐或钾盐作为抗凝剂，能与血液中的钙离子结合成螯合物，而使钙离子失去凝血作用，从而阻止血液凝固。
肝素配制
1%
肝素溶液0.1ml于试管内，旋转试管，使溶液均匀浸湿试管内壁，放入80～100℃烘箱烤干，每管能使5～10ml血液不凝。急性血压实验时可在充满
生理盐水的动脉套管内注入肝素20～25mg。体内抗凝：500～1000u/kg。 市售的肝素注射液每1ml含肝素12500u（相当于肝素钠125mg，即1mg相当于100u）。应置冰箱内保存。
枸橼酸钠配制
枸橼酸钠3.8%的枸橼酸钠溶液1份可使9份血液不凝，用于
红细胞沉降速率的测定。因其抗凝血作用较弱而碱性较强，不适用于供化验用的血液样品。做急性血压实验时则用5～7%的枸橼酸钠溶液。
草酸钾配制
草酸钾常用于供检验用血液样品的抗凝。在试管内加饱和草酸钾溶液2滴（或10%溶液0.2ml），轻轻敲击试管，使溶液分散到管壁四周，置80℃以下的烘箱中烤干（烘烤温度过高，可使草酸钾分解为
碳酸钾而失效），每管能使3～5ml血液不凝。供钾、钙含量测定的血样不能用草酸钾抗凝。
原理
不同的抗凝剂其抗凝原理略有不同。
乙二胺四乙酸（EDTA）与枸橼酸盐的抗凝原理相同：是与血液中
Ca离子结合成螯合物，使Ca失去活性，中断凝血过程，从而达到抗凝的目的。
肝素是通过加强抗凝血酶Ⅲ，灭活
丝氨酸蛋白酶，阻止凝血酶的形成来达到抗凝的目的。
草酸盐是通过其
草酸根与血液中的Ca离子形成
草酸钙沉淀，使其无
凝血功能。