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放射自显影术

通过检测放射性标记物质在细胞内的定位来观察某一特定生化反应过程的技术

免疫放射自显影术（autoradiography）：通过检测放射性标记物质在细胞内的定位来观察某一特定生化反应过程的技术。首先，将放射性同位素或放射性同位素的标记物注入动物体内或加入培养基中，间隔一定时间取材，制成标本（如切片），在暗室中于标本的上面涂以液体原子核乳胶，置暗处曝光，数日后再经显影和定影处理，或经染色后光镜观察，在放射性同位素或其标记物存在的部位，溴化银被还原成黑色的微细银颗粒，也可在电镜下观察则称之为电镜放射自显影术(electron microscope autoradiography)由此，可获知被检物质在机体、组织与细胞内的分布、数量及代谢径路。

原理
免疫放射自显影
放射性核素的原子不断衰变，当衰变掉一半时所需要的时间称为半衰期。各种放射性核素的半衰期长短不同(表)，在自显影实验中多选用半衰期较长者。对于半衰期较短的核素，应选用较快的样品制备方法，所用剂量也应加大。
联合使用
与染色技术联合使用
用放射自显影能够研究的任何细胞特征或抗原物质定位也可以用放射自显影和免疫染色联合进行研究。特别之处是同时进行抗原定位研究，操作过程直截了当。细胞用适当的方法进行放射性标记，接着进行固定和按所选用的免疫染色法进行染色(注意：此时样品和洗涤后的溶液应该作为放射性物品处理)。然后对细胞样品进行放射自显影，可以同时进行显影银粒和免疫染色观察。
关系
放射自显影与免疫染色联合应用最常用于研究DNA合成与抗原定位表达之间的关系。这时细胞用3H_TdR标记后，进行免疫染色和放射自显影。这个方法能够敏感而精确地研究正在进行DNA合成的细胞中抗原表达的位置。尽管如此，一般情况下建议用双标记法进行这类研究，在细胞培养基中加入BrdU标记新合成的DNA，接着用2种不同颜色染料标记的抗体按上述双标记法进行细胞染色，其中抗体之一是针对BrdU的抗体(已经商品化)，而另一种抗体是针对所研究的抗原。
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