李痘病毒

病毒类别

李痘病毒：学名 Plum pox virus,异名李树病毒7（Prunus virus7）; 环面李痘病毒（Annulus pruni）; 李树痘病毒（Sarka virus）,英文名 Plum pox virus 缩写：PPV,分类地位马铃薯Y病毒科马铃薯Y病毒组·

简介

环面李痘病毒（Annulus pruni）; 李树痘病毒（Sarka virus）

英文名 Plum pox virus

分类地位马铃薯Y病毒科马铃薯Y病毒组

分布

PPV最先于1915年在保加利亚发现，然后1936年在南斯拉夫，1941年罗马尼亚发现，大约30年后PPV在大多数欧洲国家都发现，包括：阿尔巴尼亚、澳大利亚、保加利亚、塞浦路斯、前捷克斯洛伐克、埃及、法国、德国、希腊、匈牙利、意大利卢森堡、波兰、葡萄牙、罗马尼亚、西班牙、叙利亚、土耳其、英国、前苏联、前南斯拉夫。基于这种分布，PPV是典型的欧洲大陆的病毒，特别是中部和南部地区。根据该病毒的侵染症状，新西兰的杏树上也发现这种病毒。随着植物材料的世界性分布，美国也面临着PPV侵染的危险。

寄主植物

PPV能侵染很多木本科和草本科寄主。木本寄主包括李属24个易侵染种类。能够在一些很重要的经济作物（包括李，杏，桃，樱桃李，洋李）的叶子和果树上引起痘泡症状。最主要的自然寄主是Prunus spinosa，通常不出现任何症状（Jordovi，Festi &Tankovi，1969）。起初认为PPV侵染仅仅局限于李属，Sutic et al（1972a）认为Sorbus domestica是PPV的实验寄主。但是van Oosten（1970，1971）发现，180种（28科）实验植物中8科60种植物是新的寄主，其中有的是寄主植物，有的是园艺植物，包括宝盖草（Lamiun amplexicaule）、Ranunculus arvensis，龙葵（Solanum nigrum）和百日草（Zinnia elegans）。

自然寄主范围和症状

洋李Prunus domestica栽培品种Poegaca（Kjustendilska sliva）、Hauszwetsche或Grosse Grüne Reneklode：叶片上出现严重的扩散淡绿环或斑驳，Po?egaca,Czar 和Hauszwtsche品种的水果会出现严重的痘泡症状，果皮上出现深色的环，果肉出现红色或淡红色，果核带棕色斑点，大约有90%果实在未成熟前落果。

桃（Prunus persica）：叶片出现黄化叶脉、褪绿斑点和畸形，果皮出现散布的淡黄色斑点。（Schuch，1962）

杏（Prunus armeniaca）：叶片出现散布的暗绿色斑和线，果实变形，果皮散布着坏死环，核上有黄色的环。（Németh，1964）

易受侵染的诊断寄主的种类及症状：

菊叶香藜（Chenopodium foetidum）：叶片出现散布的带黄色的或坏死的局部斑点。（Németh，1964）无系统症状。

田野毛茛（Ranumvulus arvensis）：黄色的局部枯斑和系统的同心环（van Oosten，1970）。

Nicandra physalodes：黑棕色坏死枯斑。

Prunus domestica cvs Italian prune and pozegaca：褪绿环、条带和斑点。

P．Japonica：萎黄斑。

P．Maritima：萎黄斑，叶脉坏死。

P．Sibirica：暗淡的线条。

P．Tomentosa：幼叶变形和偏上行，老叶褪绿斑和坏死斑。

Sorbus.domestica：黄斑，叶片萎黄。

不易侵染的诊断寄主的种类：

苋色藜（Chenopodium amaranticolor），Crataegus monogyna，Malus domestica, Prunus avium，Pyrus communis。

保存和繁殖寄主：

克利夫兰烟（Nicotiana clevelandii），N.megalosiphon

鉴别寄主:

菊叶香藜是有效的局部枯斑寄主。

危害情况

树痘病害在欧洲中部和东部的水果产区特别严重。在过去的十年中，PPV已传播到一些地中海国家如埃及（Wetzel et al., 1991a;Mazyad et al. 1992），西班牙和葡萄牙（Louro and Monte Corvo, 1986）。智利也有报道（Herrera et al. 1998）。

病毒侵染能引起严重的产量损失，在高感品种中损失可达到83%-100%（Kegler and Hartmann, 1998; Nemchinov et al. 1998a;Waterworth and Hadidi, 1998）。欧洲李会在成熟前落果，而日本李和桃果实会出现环斑，杏出现严重变形。甜樱桃果实在成熟前落果并且叶子会出现褪绿坏死斑或坏死区（Nemchinov et al., 1998a）。然而病害的严重性在很大程度上受寄主是感病还是耐病品种的影响。

形态特征

粒体线状，有明显的形态学上的长度，即长为660-770nm，宽为12.5-20nm。单链正义RNA，大小为3500kDa（Dunez and ?uti?，1965），占整个颗粒重量的7%，蛋白亚基3个，分别为：43.5KD，29.KD和27KD。

汁液中粒体稳定性

钝化温度（Tip）52℃-58℃，体外存活期（Liv）：20℃ 3-4天，稀释限点：10-3-10-5。

物理性质

沉降系数180S，A260/A280=0.77-0.87

病毒提纯

病毒分离物的选择是很重要的，不同的分离物在感病组织中浓度有很大的差异。以下两种提纯病毒方法会得到较好的效果。

1． Schade（1969）100g系统侵染的克立夫兰烟叶片在300毫升去离子水中（含0.3%w/v抗坏血酸，0.01M二乙基二硫代氨基甲酸钠（DIECA））中匀浆，再加同体积预冷的氯仿一起摇动5分钟，1000g离心15分钟，取液相，以5000g15分钟，再取液相，高低速离心一次，使病毒浓缩，以0.05M，pH8.2的硼酸缓冲液重新悬浮病毒，通过寄主特异的抗血清吸附作用去掉植物蛋白。

2． Rankoric&Jordovic（1970）在接种15-20天后采集系统侵染的菊叶香藜叶片，置于4℃冰箱中冷却，每100g叶子用含0.01M DIECA和0.02M巯基乙酸的pH7.0的100毫升0.02ML磷酸缓冲液以及15毫升二乙醚和15毫升四氯化碳的混合液进行研磨。以2000g离心10min，保留液相，经两次差速离心浓缩病毒，然后再进行蔗糖密度梯度离心进一步浓缩病毒。

传播途径

流行学

蚜虫传播李痘病毒依赖于以下几个因素：侵染源，介体类群大小，易受侵染的植物和侵染源的距离。例如10年时间PPV能使距离100米的健康植物100%的受侵染，而距离500-800米，只有1.5%的植物受侵。这些数据说明如果要在已受PPV侵染的地区建立新的种植园需要必要的空间隔离。了解传播介体和病毒株系之间的关系对病害的流行是重要的。介体传毒能力因株系的不同而有很大的差异(Massonie and Maison, 1976)。实验证明，桃蚜能传播全部病毒株系，对坏死和中间株系有24.5%的传毒效率，而对黄化株系则只有8%的传毒效率。介体的作用受到病毒寄主是否适合蚜虫取食和繁殖的影响。

PPV汁液摩擦接种只适合于实验目的，自然界中不能通过剪枝和嫁接工具传播。

种子在李树中是否传毒目前还没有定论。

运动及散布

这种病害随机分布于果园中。2-3年后传染开始由第一棵感病树木扩散。如果所用材料不是无毒材料，嫁接传播能明显加速病害在感病区的扩散。地区或国家之间病毒的传播大多是由可能感病的植物材料造成的(Diekmann and Putter, 1996)。美国从东欧进口的果树材料有时侯会检测到PPV(Waterworth, 1994)。

PPV污染花粉囊在病毒的传播也可能有潜在的作用（Levy et al., 1995），然而这种可能性在实践中还没有被证实。

检疫与防治

检测方法

尽管病毒在树木中的分布不规则，但是可通过症状特别是生长活跃期的症状进行检测。将芽接种到易感病的指示植物（桃或Prunus tomentosa）后6-8周可观察症状(ISHS, 1983, 1992, 1998;OEPP/EPPO, 1983)。机械摩擦接种菊叶香藜或豌豆也可在6-8天后出现症状。

ELISA，用于检测发现PPV广泛存在于根，树皮，花，叶子，果实或种子中(Adams, 1978)。

这种方法已被定量应用(Himmler et al., 1987)。

电镜检测方法即免疫电镜(Kerlan et al., 1981)和胶体金标记技术(Himmler et al., 1988)也得到应用。

单克隆抗体能有效的区分不同的株系(Cambra et al., 1994;Boscia et al., 1997;Candresse et al., 1998)。

以同位素标记DNA或RNA的分子杂交技术，以非放射性的DIG标记的PPV c RNA 也应用于病毒的检测(Nemchinov et al., 1996)。

PCR大大提高了检测的灵敏度，提纯病毒的RNA可检测到10fg (Wetzel et al., 1991b)。免疫-PCR检测PPV也有很高的灵敏度(Wetzel et al., 1992。Candresse et al., 1994, 1998)。与IC-PCR相似的技术还有印记捕获PCR，不需研磨样品就可以检测病毒，并且在捕获阶段可用许多蛋白替代PPV特异的免疫球蛋白(Olmos et al., 1996, 1998;Cambra et al., 1998;Candresse et al., 1998);

RT-PCR特异性检测PPV3'非编码区的保守序列，这可能要利用了病毒核酸的提取和纯化。(Levy and Hadidi, 1994;Levy et al., 1994)。

PCR特异性检测PPV株系差异技术已建立起来。Candresse et al. (1998)已设计两对引物扩增和分离PPV的亚组D和亚组M。另外Nemchinov and Hadidi (1998a)已设计扩增PPV-C的特异引物。

防治

新建立的种植园必须采用无病毒的繁殖材料，这是防治PPV的首要步骤。经温热疗法产生的苗子的顶芽嫁接到无毒砧木上也是健康的母本材料。木本科和草本科的指示植物可以用于检测PPV。酶联免疫吸附（ELISA）和免疫吸附电镜都能有效的检测PPV，且灵敏度较高。

虽然病毒的自然传播不能完全控制，但可以通过一定的措施降低。其中最重要的是在周围没有侵染源的地区种植，因为在侵染地区很可能被蚜虫传播侵染。所有受侵染的李、樱桃李、杏等李属寄主都应该在果园建立之前彻底消灭。这一措施特别适用于在轻度感染地区建立新的李树园。

防治蚜虫以控制病毒传播是保护苗圃、新建的李树园和发病较轻的地区的不可缺少的措施。隔离措施可能有助于防治病毒传播。

虽然这些措施都是不可缺少的，但是依目前条件，它们不能完全防止PPV的侵染。抗病和耐病的植物为这一问题提供了很好的解决方法。对前南斯拉夫和其它国家的调查研究发现许多抗PPV或耐PPV的李栽培种，其中有些在严重发病的地区生长。它们的应用还依赖于果实品质、对环境和土壤的适应性等因素。抗病和耐病的李栽培种和克隆是培育新的杂交种的重要的基因材料。

注：李痘病毒、李伪痘病毒和李纹斑病毒所引起李属植物的症状有时十分相似。李痘病毒经常与杏坏死环斑病毒或杏矮缩病毒一起混合侵染。为了区别这些病毒，必须用几种植物进行试验。建议适用下列植物：

青葙（Celosia argentea）

菊叶香藜,欧洲甜樱桃,洋李,樱花（Prunus serrulata）,Shirofugen品种

全国各地天气预报查询

上海市

云南省

云南省

云南省