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核苷磷酸化酶

能分解核苷生成含氮碱和戊糖的磷酸酯的酶

核苷磷酸化酶（nuclosidephosphoryalse）：能分解核苷生成含氮碱和戊糖的磷酸酯的酶。 嘌呤核苷磷酸化酶(英文名称：Purinenucleosidephosphorylase，或简写为PNPase)是参与嘌呤代谢的一种酶。嘌呤核苷磷酸化酶可以代谢腺苷到腺嘌呤，肌苷到次黄嘌呤，鸟苷到鸟嘌呤，并在这些反应中产生核糖-5-磷酸。 需要注意的是，PNPase这一简称还被用于另一个不相关的酶，多核苷酸磷酸化酶（PolynucleotidePhosphorylase）。 嘌呤核苷磷酸化酶缺陷型病患会有免疫缺陷，而只有免疫系统中的T细胞和B细胞不受此缺陷影响。

检测方法
核苷磷酸化酶
简介
以次黄苷+磷酸次黄嘌呤+核糖-1-磷酸的方式，参与将核苷加磷酸分解成五碳糖磷酸反应的酶之总称。已知有几种对底物的特异性不同，如嘌呤核苷磷酸化酶（EC2．4．2．1）对鸟苷、脱氧鸟苷、次黄苷、脱氧次黄苷具有作用，它存在于脾、肺、肝、心肌、红血球、酵母中，小肠和血液中也有少量存在。另外已知嘧啶核苷磷酸化酶是对尿苷和胸腺苷分别具有特异性的酶。推测主要是分解核苷或具有供给合成其它核苷所需的核糖磷酸的作用。
相关资料
核苷磷酸化酶通式(I)的化合物，它们是嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)、嘌呤磷酸核糖转移酶(PPRT)、5’-甲硫基腺苷磷酸化酶(MTAP)、5’-甲硫基腺苷核苷酶(MTAN)和/或核苷水解酶(NH)的抑制剂。本发明还涉及这些化合物在治疗包括癌症、细菌感染、原生动物感染、T-细胞介导的疾病在内的疾病和感染中的应用，并涉及含有这些化合物的药物组合物。
通过双酶切方法将重组质粒上大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)基因克隆到pBV220表达载体上，构建了温敏型PNPase的表达载体pBV220-PNP，转化大肠杆菌DH5α并使之表选。SDS-PAGE电泳结果显示出明显的特异表达条带，其分子量约为26kDa。在此基础上研究了不同诱导条件对蛋白表达量的影响分别以肌苷和尿苷为核糖供体研究重组菌转化腺苷的条件，发现肌苷最适合作为核糖供体，在30mmol·L^(-1)pH7.5的Na2HPO4-KH2PO4缓冲液中，以30mmol·L肌苷和10mmol·L^(-1)腺漂呤作底物，加入0.5%基因工程湿菌体60℃反应3h，腺苷的转化率为85.57%。
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