热力灭菌

物体达到无菌状态的方法

高温对细菌有明显的致死作用。热力灭菌法包括干热灭菌与湿热灭菌法。干热灭菌可使菌体蛋白质变性及电解质浓缩。湿热灭菌可使菌体蛋白质变性，核酸降解及损伤细菌的细胞膜。湿热灭菌的优越性有穿透力强，菌体吸收水分易变性凝固及蒸汽有潜在热能。

介绍

高温对细菌有明显的致死作用。热力灭菌主要是利用高温使菌体变性或凝固，酶失去活性，而使细菌死亡。但是，更细微的变化已发生于细菌凝固之前。有人认为DNA单螺旋的断裂可能是主要的致死因素。细菌蛋白质、核酸等化学结构是由氢键连接的，而氢键是较弱的化学键，当菌体受热时，氢键遭到破坏，蛋白质、核酸、酶等结构也随之被破坏，失去其生物学活性，与细菌致死有关。此外，高温亦可导致胞膜功能损伤而使小分子物质以及降解的核糖体漏出。干热的致死作用与湿热不尽相同，一般属于蛋白变性、氧化作用受损和电解质水平增高的毒力效应。

热力灭菌时最可靠而普遍应用的灭菌法，包括湿热灭菌和干热灭菌法。

原理

灭菌是指杀灭一切生物（包括细菌芽孢），使物体达到无菌状态的一类方法。如常用的湿热灭菌和干热灭菌。

方法

常用的灭菌方法在食用菌的科研和生产中常用的灭菌方法是热力灭菌和辐射灭菌。

热力灭菌

热力灭菌：利用高温杀死微生物的方法称热力灭菌。当高温作用于微生物时，使细胞膜的结构变化，酶钝化，蛋白质凝固，从而使细胞死亡。根据微生物生长发育与温度的关系，可将微生物划分为低温性微生物、中温性微生物和高温性微生物三大类。不同温度型的微生物对高温的抵抗力不同。当环境温度超过微生物生长的最高温度范围时很容易死亡。超过的温度越高，或在高温条件下时间越长，微生物死亡越快。多数无牙孢的杆菌80~100℃下几分钟就几乎全部死亡，但在70℃下需10~15min才能致死，而在60℃下必须30min以上才被杀死。霉菌的孢子通常86~88℃加热30min即可死亡。但一些细菌的芽孢耐热性极强，在100℃下30min还能生存。所以，灭菌彻底与否，一般以杀死细菌的芽孢为标准。不同微生物对高温的耐受力也不同。一般说来，处于营养生长期细胞耐热性差，处于休眠状态的细胞，如各类孢子耐热性较强。

影响热力灭菌效果的因素很多，这主要是微生物的种类、数量、生理状态、温度、湿度、时间、介质成分和pH等。被灭菌材料中的真菌类微生物较细菌，特别是产生芽孢的细菌易于杀灭；在被灭菌材料中微生物基数大的情况下，同样的灭菌温度、灭菌时间不及微生物基数小的材料灭菌效果好。灭菌的温度越高，时间越长，灭菌效果越好；湿热灭菌较干热灭菌需要的温度低，时间短；在一定温度下，湿热灭菌较干热灭菌效果好。一般来说，被灭菌的基质pH高的不及低的易达到灭菌效果。因此，热力灭菌时要注意被灭菌材料的微生物状况、含水量和pH等诸多因素，选择适当的灭菌温度和时间，以达到彻底灭菌的效果。此外，在对培养基和培养料进行灭菌时，还必须注意灭菌温度和时间对培养基和培养料的化学成分的影响，对一些营养成分，灭菌温度不可过高，时间也不宜过长，以防灭菌过程中产生大量的不利与于食用菌生长的物质。常用的热力灭菌方法有：

干热灭菌

干热灭菌：干热灭菌主要有火焰灭菌和高温烘烤灭菌两种。火焰灭菌就是通过火焰高温灼烧进行灭菌的方法。如接种时，接种环、接种钩、接种勺、接种铲、解剖刀、镊子等通过酒精灯火焰的灼烧，可以达到灭菌效果。瓶口和试管口在酒精灯火焰上通过几次，温度可达到200℃以上，一切微生物（包括细菌芽孢）都可杀死，达到无菌状态。高温烘烤灭菌是利用高温干燥空气进行灭菌的方法。使用的仪器是高温干燥箱（干热烤箱）。干热灭菌使用于固体非生物性材料，与培养皿、吸管等，不适于液体和生物性材料，如培养基、培养料等。干热灭菌要求温度160~162℃2h。不可温度过高，温度过高时包装灭菌物品的纸张或棉、布类易被热空气烤焦，甚至燃烧。干热灭菌升温时，要使其自然降温，干燥箱内温度降至80℃以下时才可开门。

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