胰激肽原酶

药品

胰激肽原酶，存在于哺乳动物胰腺等器官及尿液分泌物中，是激肽体系中的一个组成部分，又称血管舒缓素或胰激肽释放酶，从动物胰腺中提取的一种蛋白水解酶，属蛋白水解酶类。由18种氨基酸和4种糖所组成，有扩张血管、改善血液循环和微循环以及防止血栓形成的作用。

化合物简介

物理性质

外观与性状：白色或类白色粉末

溶解度：在水中易溶，在乙醇或乙醚中几乎不溶

化学性质

激肽释放酶是从猪的颚下腺或胰脏中提取的一种有舒张血管作用的物质。为白色或灰白色粉末；易溶于水（10%）、稀醇，不溶于浓乙醇和一般有机溶剂。溶于水或生理盐水后成无色或微黄色的澄明溶液。pH4.5～7.8时较稳定。对热、强酸、强碱、氧化剂均不稳定。等电点为3.9～4.37。

一般说来，纯度越高，稳定性越差。干燥粉末在-20℃保存数月活性不变。在pH=8的水及缓冲液中，冷冻保存可持续相当长时间不失活。重金属离子Hg2+、Ca2+、Mn2+、Ni2+、等对它有同程度的抑制作用（Ca2+、Mg2+对酶活性无影响），巯基化合物及螯合剂EDTA等可逆转金属离子对它的抑制。相反高浓度Ca2+（1mol/L）可使酶活性增加15%～20%。某此胰蛋白酶抑制剂如抑肽酶，二异丙基磷酸等对胰及颌下腺激肽释放酶均有抑制作用。

药典信息

来源

本品系自猪胰中提取的蛋白酶。每1mg蛋白含胰激肽原酶的活力不得少于300单位（供口服用）或600单位（供注射用）。

制法要求

本品应从检疫合格的猪胰中提取，生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》的要求。本品来源于动物，在生产过程中应采用适宜的病毒灭活工艺等方法进行病毒安全性控制。

性状

本品为白色或类白色粉末，无臭。

本品在水中易溶，在乙醇或乙醚中几乎不溶。

鉴别

1、照紫外-可见分光光度法（通则0401）测定。

供试品溶液：取已测得效价的本品适量，精密称定，加纯度项下的磷酸盐缓冲液（pH7.0）溶解并定量稀释制成每1mL中含10单位的溶液。精密量取4mL，置10mL量瓶中，用上述磷酸盐缓冲液（pH7.0）稀释至刻度。

测定法：取效价测定酶活力项下的底物溶液2.9mL，在30℃±0.5℃预热5分钟，置1cm比色池中，精密加入供试品溶液0.1mL，混匀，立即计时，使比色池内的温度保持在30℃±0.5℃，在253nm的波长处测定，以上述磷酸盐缓冲液（pH7.0）0.1mL代替供试品溶液，同法操作，作为空白对照。准确读取4分钟时的吸光度（A4）和6分钟时的吸光度（A6）。求得A值[(A6-A4)/2]，按下式计算。

式中，a为供试品溶液每1mL中的毫克数；

b为供试品每1mg的效价单位数。

结果判定：R值（水解速率）应为0.12~0.17。

2、在纯度项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。

检查

酸碱度

取本品适量，加水溶解并制成每1mL中含300单位的溶液，依法测定（通则0631），pH值应为5.5～7.5。

溶液的澄清度

取本品适量，加水溶解并制成每1mL中含2mg的溶液，依法检查（通则0902第二法），溶液应澄清。（供注射用）

脂肪

取本品1.0g，置具塞锥形瓶中，加乙醚20mL，密塞，时时旋动，放置约30分钟后，将乙醚液倾至用乙醚润湿的滤纸上，滤过，再用乙醚10mL洗涤残渣，合并滤液及洗液至已恒重的蒸发皿中，除去乙醚，在105℃干燥2小时，精密称定，遗留脂肪不得过5mg。

相关蛋白酶

照紫外－可见分光光度法（通则0401）测定。

供试品溶液：取本品适量，加纯度项下的磷酸盐缓冲液（pH7.0）溶解并稀释制成每1mL中含1单位的溶液。

测定法：精密量取供试品溶液1mL置试管中，在35°C±0.5℃水浴中保温5分钟，精密加入已预热至35℃±0.5℃的酪蛋白溶液（取酪蛋白0.6g，加0.05mol/L磷酸氢二钠溶液80mL，65℃加热溶解，放冷，调节pH值至8.0，用水稀释至100mL，临用前配制）5mL，混匀，于35℃±0.5℃水浴中准确反应20分钟，再精密加入5%三氯醋酸溶液5mL，混匀，滤过，取续滤液作为测定溶液，另精密量取供试品溶液1mL，置试管中，精密加入5%三氯醋酸溶液5mL，混匀，于35℃±0.5℃水浴中准确反应20分钟，再精密加入上述酪蛋白溶液5mL，混匀，滤过，取续滤液作为空白，在2小时内，在280nm的波长处分别测定吸光度。

限度：吸光度不得过0.2。

纯度

照高效液相色谱法（通则0512）测定。

磷酸盐缓冲液（pH7.0）取磷酸氢二钠10.9g，磷酸二氢钠2.3g，加水溶解并稀释至1000mL，用50%磷酸溶液调节pH值至7.0。

供试品溶液：取本品适量，加流动相A溶解并稀释制成每1mL中约含200单位的溶液。

对照品溶液：取胰激肽原酶对照品（纯度应大于95%）适量，加流动相A溶解并定量稀释制成每1mL中约含200单位的溶液。

色谱条件：用疏水性凝胶为填充剂（TSKgel Phenyl-5PW，7.5mm×75mm，10µm或其他适宜的色谱柱），以含1.7mol/L硫酸铵的磷酸盐缓冲液（pH7.0）为流动相A，以磷酸盐缓冲液（pH7.0）为流动相氐按下表进行梯度洗脱，柱温为25°C，流速为每分钟0.5mL，检测波长为280nm，进样体积20μL。

系统适用性要求：理论板数按胰激肽原酶峰计算不低于1500，胰激肽原酶主峰与相邻杂质峰之间的分离度不得低于0.8。

测定法：精密量取流动相A、供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。将供试品溶液与对照品溶液的色谱图扣除流动相A色谱图（作为空白基线），进行基线校正。

限度：供试品溶液色谱图中，量取空白基线拐点（约16分钟）后所有色谱峰面积，按面积归一化法计算，与对照品溶液主峰保留时间一致的主峰面积不得低于75%（供口服用）或90%（供注射用）。

干燥失重

取本品0.50g，以五氧化二磷为干燥剂，在60℃减压干燥4小时，减失重量不得过5.0%（通则0831）。

炽灼残渣

取本品0.50g，依法检查（通则0841），遗留残渣不得过3.0%。

细菌内毒素

取本品，依法检查（通则1143），每1单位胰激肽原酶中含内毒素的量应小于2.5EU。（供注射用）

效价测定

酶活力

照紫外-可见分光光度法（通则0401）测定。

供试品溶液：取本品适量，精密称定，加纯度项下的磷酸盐缓冲液（pH7.0）适量使溶解并定量稀释制成每1mL 中约含10单位的溶液。

标准品溶液：取胰激肽原酶标准品，按标示单位，加上述磷酸盐缓冲液（pH7.0）适量使溶解并定量稀释制成每1mL中含10单位的溶液。

底物溶液：取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐17.7mg，加三羟甲基氨基甲烷缓冲液（称取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800mL溶解，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0，用水稀释至1000mL）适量使溶解并稀释至100mL，4°C保存。

测定法：取25℃±0.5℃水浴中预热的底物溶液2.5mL，置1cm比色池中，分别精密加入供试品溶液或标准品溶液 0.1mL，混匀，立即计时，使比色池内的温度保持在25℃±0.5℃，在253nm波长处，以底物溶液为空白，准确读取1分钟时的吸光度A0和3分钟时的吸光度A，标准品溶液和供试品溶液需平行测定3次，分别求得标准品溶液和供试品溶液的ΔA值（6ΔA=A-A0）的平均值，代入下式计算。

式中，P为每1mg供试品中含胰激肽原酶的量，单位；

为供试品溶液的ΔA值的平均值；

为标准品溶液的ΔA值的平均值；

Ps为标准品溶液的单位数；

n为稀释倍数；

W为供试品量，mg。

蛋白含量

取本品约10mg，精密称定，照蛋白质含量测定法（通则0731第一法）测定，即得。

比活

由测得的酶活力和蛋白含量计算每1mg蛋白中含胰激肽原酶的单位数，即得。

类别

血管舒张药。

贮藏

遮光，密封，在阴凉干燥处保存。

制剂

胰激肽原酶肠溶片。

药品简介

药理作用

其作用机制为：

1、降解激肽原，生成激肽，从而扩张小血管和毛细血管、改善血管通透性及血流量。

2、通过缓激肽和组胺多肽对血栓烷B2（TXB2）的负反馈，促使血管内皮细胞产生PGI2，从而抑制血小板效应以防止凝血。

3、激活纤溶酶原转变为纤溶酶，以提高纤溶活性，降低血浆中纤维蛋白含量，有利于防止血栓形成。

4、本药还可降低肾血管阻力、心肌耗氧量及减少心肌细胞缺氧缺糖性损伤，从而起到增强心肌收缩力、改善心功能和增加血流量的作用。

药代动力学

健康成年人口服3片（56U）后，用酶免疫法测定其达峰时间为4h，t1/2为7h左右。用Ⅰ标记的胰激肽释放酶经小白鼠十二指肠给药，测定其在动物体内的吸收、分布、代谢情况，结果表明：药物在肠管壁吸收，给药24h后，肝、肾脏器的分布浓度达最高峰，测得尿中的浓度比血浆高出2倍，提示本品通过肾脏排泄。

适应症

可用于多种心、脑血管病变，如原发性高血压、动脉硬化、冠状动脉粥样硬化性心脏病、脑动脉硬化、脑血栓、视网膜供血障碍以及周围血管病变等。近来研究发现，本品可用于防止糖尿病微血管病变及早期糖尿病性肾病(有较好的治疗效果，可减少尿清蛋白的排出量)。国外有临床资料提示，本品可增加精子的活性及生成数量，对治疗某些男性不育症有一定的疗效。

用法用量

成人常规剂量：

1、口服给药：肠溶片：一次120～240U，一日360～720U，空腹服用。

2、皮下注射：一次10～20U，一日l～2次，3周为一疗程。

3、肌内注射：一日10～40U，一日1次或隔日1次。临用前，加灭菌注射用水1.5ml溶解。

4、结膜下注射：一次5U。

不良反应

是从猪胰腺中提取的蛋白水解酶，为一种内源性药物，不良反应甚少。用药期间偶见头昏、乏力等反应。极个别患者可出现皮疹，对症处理后消失。

注意事项

1、本药不能与蛋白酶抑制药同时使用。

2、慎用：（1）近期脑血管意外患者；（2）脑出血或有其他出血倾向患者。

3、药物对妊娠的影响：尚不明确。