色谱峰

组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线

色谱峰是组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线(高斯Gauss曲线)。不对称色谱峰有两种:前延峰(leading peak)和拖尾峰(tailing peak)。

简介
待测组分由色谱柱流出的后通过检测器系统时所产生的响应信号和微分曲线称为色谱峰,或简称峰。
拖尾因子(tailing factor,T)——T=,用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子(symmetry factor)或不对称因子(asymmetry factor)。《中国药典》规定T应为0.95~1.05。T1.05为拖尾峰。
峰底——基线上峰的起点至终点的距离。
峰高(peak height,h)——峰的最高点至峰底的距离。
峰宽(peak width,W)——峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。W=4σ
半峰宽(peak width at half-height,Wh/2)——峰高一半处的峰宽。Wh/2=2.355σ
标准偏差(standard deviation,σ)——正态分布曲线x=±1时(拐点)的峰宽之半。正常峰的拐点在峰高的0.607倍处。标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。σ小,分散程度小、极点浓度高、峰形瘦、柱效高;反之,σ大,峰形胖、柱效低。
峰面积(peak area,A)——峰与峰底所包围的面积。A=×σ×h=2.507 σ h=1.064 Wh/2 h
色谱峰常见问题汇总
(1)峰丢失
可能的原因:注射器有毛病;可采用的排除方法:用新注射器验证。
可能的原因:未接入检测器,或检测器不起作用;可采用的排除方法:检查设定值。
可能的原因:进样温度太低;可采用的排除方法:检查温度,并根据需要调整。
可能的原因:柱箱温度太低;可采用的排除方法:检查温度,并根据需要调整。
可能的原因:无载气流;可采用的排除方法:检查压力调节器,并检查泄漏,验证柱进品流速。
可能的原因:柱断裂;可采用的排除方法:如果柱断裂是在柱进口端或检测器末端,是可以补救的,切去柱断裂部分,重新安装。
(2)前沿峰
可能的原因:柱超载;可采用的排除方法:减少进样量。
可能的原因:两个化合物共洗脱;可采用的排除方法:提高灵敏度和减少进样量,使温度降低10~20度,以使峰分开。
可能的原因:样品冷凝;可采用的排除方法:检查进样口和柱温,如有必要可升温。
可能的原因:样品分解;可采用的排除方法:采用失活化进样器衬管或调低进样器温度。
(3)拖尾峰
可能的原因:进样器衬套或柱吸附活性样品;可采用的排除方法:更换衬套。如不能解决问题,就将柱进气端去掉1~2圈,再重新安装。
可能的原因:柱或进样器温度太低;可采用的排除方法:升温(不要超过柱最高温度)。进样器温度应比样品最高沸点高25度。
可能的原因:两个化合物共洗脱;可采用的排除方法:提高灵敏度,减少进样量,使温度降低10~20度,以使峰分开。
可能的原因:柱损坏;可采用的排除方法:更换柱。
可能的原因:柱污染;可采用的排除方法:从柱进口端去掉1~2圈,再重新安装。
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