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血浆凝固酶

多数致病菌株能产生的凝固酶

血浆凝固酶是多数致病菌株能产生的凝固酶，能使含有肝素等抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质，致病株大多数能产生，是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标。

性质
血浆凝固酶分子量为80449.3，等电点为8.82，耐热性强，100℃ 30min仍然保持活性，可被蛋白酶破坏。金黄色葡萄球菌血浆凝固酶有两种分布：一种分泌至菌体外的，称为游离凝固酶（free coagulase）；另一种存在于菌体细胞壁上，称为结合凝固酶（bound coagulase）或凝聚因子（chumping factor）。血浆凝固酶具有较强免疫原性，慢性金黄色葡萄球菌感染患者血液内能检测到大量血浆凝固酶抗体的存在。血浆凝固酶能被人血浆中的协同因子（cofactor）激活变成凝血酶类似物，进而催化可溶性纤维蛋白原变为不溶性纤维蛋白，从而使血浆凝固。不溶性纤维蛋白包裹在菌体表面，在其保护下菌体既能免受血清中杀菌物质的作用，也能抵抗巨噬细胞的吞幢。
金黄色葡萄球菌引起的感染易于局限化和形成血栓，不常发生全身性感染，这与凝固酶密切相关。血浆凝固酶试验是判断金黄色葡萄球菌的致病力的重要手段，同时也是金黄色葡萄球菌最重要的鉴别手段。
检验方法
血浆凝固酶的检测最常用的方法是兔血浆凝固法，标准操作方法如下：
用生理盐水将兔血清1:5稀释，取化0.5 mL稀释后的兔血清加入到试管中，再加0.3 mL待测液，样品和血清混合均匀置37℃恒温培养箱内，每间隔30 min观察1次结果。该试验需要同时做已知样品的阳性、阴性对照。若6 h内样品管出现凝固，阳性对照管出现凝固，阴性对照管不凝固，才可判断样品为阳性。
注意事项
1.每隔30 min应当及时观察，因为某些菌株可产生葡萄球菌激酶，葡萄球菌激酶是一种溶纤维蛋白酶，可使己凝聚的血浆重新溶解，如不及时观察就会产生假阴性结果。
2.使用的血浆应为无菌血浆，如果血浆受溶血性细菌污染则会产生假阴性，如果血浆受环境中的金黄色葡萄球菌污染则会产生假阳性。
3.不可在高盐培养基上挑取菌落直接进行血浆凝固酶实验，因为盐能使血浆自凝导致假阳性。
4.应当使用BHI新鲜培养物，放置时间过长的培养物内血浆凝固酶活性会降低导致假阴性。
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