马铃薯培养基

用于马铃薯的培养基

英文名PDA，马铃薯去皮，切成块加水，煮沸30min（注意火力的控制，可适当补水），用纱布过滤，滤液加糖，补足水至100ml，装入三角瓶，高温蒸汽灭菌。

马铃薯煮汁处理方法1

1.称量和熬煮

按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中，加水至1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。

2.加热溶解

把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前捣碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻璃棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。

3.分装

按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml锥形瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

分装量：固体培养基约为试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。

4.加棉塞

培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。

5.包扎

加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。

扩展资料

防止污染应该注意以下事项

确认工作细胞库是否被污染，确认毒种工作种子批是否被污染，确认所用培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染，均可用细菌、真菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。

其它

高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证，确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证，后者应在每次除菌前、后进行验证工作(至少应在除菌后进行一次)。

另外，应将有毒区与无毒区严格分开，并有各自独立的空气净化系统及孵室，有毒区对无毒区应保持相对负压，防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。

马铃薯煮汁处理方法2

材料

马铃薯20g、蔗糖 2g、自来水 100mL、琼脂 2g、pH 自然(约6.0)

灭菌：1.05kg/cm2，20min

处理方法

马铃薯去皮，切成块加水，煮沸30min(注意火力的控制，可适当补水) ，用纱布过滤，滤液加糖，补足水至100ml，装入三角瓶。

综合马铃薯培养基 20%马铃薯煮汁 1000 毫升磷酸二氢钾 3克硫酸镁 1.5克葡萄糖 20克维生素 10毫克琼脂 18克先配制20%马铃薯煮汁，方法同上。在煮汁中加入上述各种组分，加热溶解后补足水分，调整pH值到6。分装，灭菌，备用。该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。马铃薯糖琼脂培养基把马铃薯洗净去皮，取200克切成小块，加水1000毫升，煮沸半小时后，补足水分。在滤液中加入10克琼脂，煮沸溶解后加糖20克(用于培养霉菌的加入蔗糖，用于培养酵母菌的加入葡萄糖)，补足水分，分装，灭菌，备用。把这培养基的pH值调到7.2～7.4，配方中的糖，如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。按所用原料不同，可分为两类：应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的，称为天然培养基;应用化学药品配成并标明成分的，称为合成培养基或综合培养基。马铃薯培养基就是天然培养基，综合马铃薯培养基就是人工合成的。

不同的生物需要不同培养基，注意配方的选取，称取要准确，误差不能太大对于特殊物品，不能灭菌的要用过滤方法除菌。配好后高温高压灭菌，可以在室温下放置很久，如果打开使用过一次，请放置冰箱。如果长时间不用，一定要重新配置，不能拿以前的用来培养，避免污染。

培养基的制备程序不同类型培养基制备的程序也不尽相同。但一般培养基的程序主要可分为：配料、溶化、矫正pH、澄清过滤、分装、灭菌及检定等8个步骤。

(一)配料

按培养基处方准确称取各种成分，先在三角烧瓶中加入少量蒸馏水，再加入各种成分，以防蛋白胨等粘附于瓶底，然后再以剩余的水冲洗瓶壁。

(二)溶化

将各种成分混匀于水中，最好以流通蒸气溶化半小时，如在电炉上溶化应随时搅拌，如有琼脂成分时更应注意防止外溢。溶化完毕，补足失去的水分。

(三)矫正pH

1.pH测定

取与标准管同口径的试管(通常用华氏试管)3支，于第1、3管各加入欲测定pH的的培养基5ml，并于第一管中加入0.2g/L的酚红0.25ml作为测定管，混匀;于第2管加入蒸馏水5ml，第4管为pH标准比色管。

2.pH的校正

若测定管过酸或过碱可用0.1mol/L 氢氧化钠或0.1mol/L盐酸溶液矫正，直至颜色与标准管相同为止，加碱或加酸时要精确缓慢，每加1滴后要充分混匀，比色后再加第2滴(有时仅加半滴)准确记录加入的量。

3.计算