索氏提取法

从固体物质中萃取化合物的方法

索氏提取法，又名连续提取法、索氏抽提法，是从固体物质中萃取化合物的一种方法。索氏提取法，用于粗脂肪含量的测定。脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中，测定脂肪的含量，可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。国内外普遍采用抽提法，其中索氏抽提法（Soxhlet extractor method）是公认的经典方法，也是我国粮油分析首选的标准方法。此法花费时间较长，在实验室多采用脂肪提取器(索氏提取器)来提取。

原理

利用溶剂回流和虹吸原理，使固体物质每一次都能为纯的溶剂所萃取，所以萃取效率较高。萃取前应先将固体物质研磨细，以增加液体浸溶的面积。然后将固体物质放在滤纸套内，放置于萃取室中。安装仪器。当溶剂加热沸腾后，蒸汽通过导气管上升，被冷凝为液体滴入提取器中。当液面超过虹吸管最高处时，即发生虹吸现象，溶液回流入烧瓶，因此可萃取出溶于溶剂的部分物质。就这样利用溶剂回流和虹吸作用，使固体中的可溶物富集到烧瓶内。

由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外，还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质，因而索氏提取法测定的结果只能是粗脂肪。

实验材料

油料作物种子、中速滤纸

仪器

索氏提取器，干燥器(直径15～18cm，盛变色硅胶)，不锈钢镊子（长20cm），培养皿，分析天平（感量0.001g），称量瓶，恒温水浴，烘箱，样品筛（60目）。

应用

适用范围

适用于商品粮食、油料中粗脂肪含量的测定。

原理

试剂

无水乙醚（A.R）

海砂

仪器设备

分析天平：感量0.0001 g

索氏抽提器一套（各部件必须洗净，用105℃温度烘干，其中抽提瓶烘至恒重）；

试样制备

禾谷类粮食和豆类（花生除外）分取除去杂质的净试样30～50 g，磨碎通过直径1.0 mm圆孔筛装入广口瓶内备用。

操作步骤

预试验

空白试验

样品测定

1 精密称取2～5g试样（可取测定水分后的样品），必要时拌以海砂，全部移入滤纸筒内。

2 将滤纸筒放入脂肪抽提器内，连接已干燥至恒重的接受瓶，由抽提器抽提冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处，于水浴上加热，使乙醚或石油醚不断回流提取，一般抽提6～12小时。

3 取下接受瓶，回收乙醚或石油醚，待接受瓶内乙醚剩1～2ml时在水浴上蒸干，再于95～105℃干燥2小时，放入干燥器内冷却0.5小时后称量。

工作曲线

结果计算

X1= (m1-m0)/m2 x 100

式中： X1—样品中脂肪的含量，%

m1—接受瓶和脂肪的质量，g

m0—接受瓶的质量,g

m2—样品的质量,g

精密度

双试验结果允许差：粮食、油料不超过0.4%

参考文献

GB 5009.6－85 食品中脂肪的测定方法。

注意事项

脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中，测定脂肪的含量，可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。脂肪含量的测定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。国内外普遍采用抽提法，其中索氏提取法（Soxhlet extractor method）是公认的经典方法，也是我国粮油分析首选的标准方法。索氏抽提法以索氏提取器为提取仪器，采用低沸点有机溶剂（乙醚或石油醚）回流抽提，除去样品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，计算粗脂肪含量。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外，还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂肪物质，因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。

河南农业大学自2006 年开设农产品标准化与贸易专业以来，农产品中脂肪含量测定实验一直是本专业的本科生主要实验之一，结合近年来实验教学中总结的一些体会，笔者就索氏提取法测定农产品中脂肪含量实验中试剂选择、样品处理、提取等几个注意事项进行探讨。

抽提试剂的选择

利用相似相溶规律，农产品中脂肪极性一般较小，可采用石油醚或乙醚作为抽提试剂。常见实验室用石油醚有低沸程（30~60℃）和高低沸程（60~90℃）两种，一般选用低沸程石油醚为抽提溶剂有利于缩短提取时间。若选择乙醚为抽提试剂，则必须十分注意乙醚的安全使用。抽提室内应严禁有明火存在或用明火加热。乙醚中不得含有过氧化物，保持抽提室内良好通风，以防燃爆。乙醚中过氧化物的检查方法是：取适量乙醚，加入碘化钾溶液，用力摇动，放置1min，若出现黄色则表明存在过氧化物，应进行处理后方可使用。处理的方法是：将乙醚放入分液漏斗，先以1/5 乙醚量的稀KOH 溶液洗涤2~3 次，以除去乙醇；然后用盐酸酸化，加入1/5 乙醚量的FeSO4 或Na2SO3 溶液，振摇，静置，分层后弃去下层水溶液，以除去过氧化物；最后用水洗至中性，用无水CaCl2 或无水Na2SO4 脱水，并进行重蒸馏。

样品粉碎度

试样粗细度要适宜。试样粉末过粗，脂肪不易抽提干净；试样粉末过细，则有可能透过滤纸孔隙随回流溶剂流失，影响测定结果。

实验中的干燥处理

测定用样品、抽提器、抽提用有机溶剂都需要进行脱水处理。这是因为：（1）抽提体系中若有水，会使样品的水溶性物质溶出，导致测定结果偏高；（2）抽提体系中若有水，则抽提溶剂易被水饱和（尤其是乙醚，可饱和约2%的水）,从而影响抽提效率；(3)样品中若有水，抽提溶剂不易渗入细胞组织内部，结果不易将脂肪抽提干净。

抽提过程中注意事项

将装有样品的滤纸包用长镊子放入抽提筒中，注入一次虹吸量的1.67 倍的石油醚，使样品包完全浸没在石油醚中。连接好抽提器各部分，接通冷凝水水流，在恒温水浴中进行抽提，调节水温在70~80℃之间，使冷凝下滴的乙醚成连珠状（120~150 滴/min 或回流7 次/h 以上），抽提至抽取筒内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹为止（约需6~12h）。抽提完毕后，用长镊子取出滤纸包，在通风处使乙醚挥发（抽提室温以12~25℃为宜）。提取瓶中的乙醚另行回收。

其他方面

（1）索氏抽提法测定脂肪最大的不足是耗时过长，如能将样品先回流1~2 次，然后浸泡在溶剂中过夜，次日再继续抽提，则可明显缩短抽提时间。

（2）若实验中样品较多的话，可采用容量更大的YG- Ⅱ型油分测定器来测定脂肪含量，温度控制在70℃左右，8h 可提取完毕。

全国各地天气预报查询

上海市

云南省

云南省

云南省