罗丹明

荧光染料

罗丹明（2-(6-Amino-3-imino-3H-xanthen-9-yl)benzoic acid methyl ester），属于激光染料，生物染色。是一种荧光染料，邻苯二酚类。外观是红色至棕色粉末，溶于水，溶于乙醇，参考浓度1mg/ml。

详细介绍

邻苯二酚类

1.罗丹明6G

英文名称： Rhodamine 6G

别名：玫瑰红6G ，罗丹明590，黄光碱性蕊香红

分子式：C28H31N2O3Cl

分子量：479.01

2.罗丹明123

英文名称：2-(6-Amino-3-imino-3H-xanthen-9-yl)benzoic acid methyl ester

分子式:C21H17ClN2O3

分子量: 380.82

3.罗丹明B

英文名称： Rhodamine B

别名：玫瑰红B

Rhodamine B

Tetraethylrhodamine

分子式: C28H31ClN2O3

分子量: 479.01

罗丹明储存条件：室温干燥保存

性质

性质：

1. 外观：红棕色粉末

2. 纯度：≥95% (HPLC)

3. 产品描述：Rhodamine 123是一种可以通过细胞膜的选择性染色活细胞线粒体的荧光染料，呈黄绿色荧光。广泛用作检测线粒体膜电位，也常用于细胞凋亡检测。它可以快速通过细胞膜，仅需几分钟就可以被具有活性的线粒体所俘获，并且对细胞没有任何毒性。

Rh123用于对许多种细胞进行染色，包括植物细胞和细菌。由于细胞内ATP的量与Rh123的荧光强度之间有相关性，因此Rh123被应用于检测细胞内的ATP。Rh123还用于癌症研究。

Rh123的最大激发波长为507nm，最大发射波长为529nm。

4．染色程序：

（1）将0.4mgRh123溶解到1mL DMSO中制备成1mMRh123-DMSO溶液。

（2）用载玻片准备细胞。细胞数目应为5×104~5×105个/mL。

（3）孵育该载玻片，用PBS或Hank's液洗涤细胞。

（4）用培养基稀释1mM Rh123溶液以制备1~20µ;M Rh123缓冲液。

（5）将Rh123缓冲液加入载玻片并在37℃下孵育30分钟至1小时。

（6）去除Rh123缓冲液并用培养基洗涤细胞（洗涤细胞后为了固定，加入10%福尔马林缓冲液并孵育15~20分钟，接着用PBS洗涤）。

（7）用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。

储存条件：室温避光保存，溶于DMSO配制成母液后-20℃保存。

应用

（1）铜离子探针

铜是人体重要的微量元素，机体内铜缺失会导致代谢紊乱和诸多疾病，如胆固醇升高，动脉弹性降低，血压升高。一直以来，铜离子生物荧光探针的研究是一个热门课题。Zhao等在2009年设计合成了一种新型罗丹明内酰胺衍生物5，并将其应用于水溶液和活体细胞中Cu2+的检测。这种比色探针对铜离子的反应是瞬时可逆的,并且在其它金属离子浓度很高的情况下也不会对铜离子的比色和荧光信号产生干扰，这一特征使其很好地满足了生物医学和环境监测方面的特殊要求。该类探针已广泛应用于环境体系中铜离子浓度的检测和生物活细胞铜离子分布成像实验，其优异的综合性能预示了应用前景。

（2）铁离子探针

铁是人体中所必须的微量元素，它在人体中主要以络离子的形式存在，与血红素、蛋白质等形成血红蛋白和肌红蛋白，在机体中起到运输和贮存氧的作用。由于Fe3+的顺磁性，一般的Fe3+荧光探针都是荧光熄灭型，不利于在牛物体内Fe3+的荧光成像及原位检测。因此利用罗丹明分子的闭环一开环间转换机理设计荧光增强型Fe3+荧光探针逐步受到重视。

（3）汞离子探针

汞是具有很高毒性的金属。汞单质及汞离子可通过各种途径进入环境，人体长期接触并摄入后会产生严重的恶心、呕吐、腹痛以及肾功能损伤等病症，危害极大。由于人们对汞毒性的高度重视，近年来对Hg2+荧光探针的研究日益增多。Xu等设计合成了一种罗丹明硫酰肼用于紫外和荧光检测水相中Hg2+，探针与Hg2+结合的化学计量比为2∶1.Qian等设计合成的高选择性的罗丹明类Hg2+荧光探针不仅可以实现对Hg2+的荧光检测，而且利用显色反应可以对Hg2+的存在进行初步判断。该探针具有可逆性，当向显色的平衡体系中加入EDTA后，体系的紫红色变为无色。另外，荧光响应速度快是该探针的另一特点，Hg2+加入后立即产生稳定的强烈荧光，与同类的探针需要一定的平衡时间相比，该探针更适合于环境或者生物样品的实时分析。

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