蛋黄卵磷脂

药用辅料

蛋黄卵磷脂是一种磷脂混合物,其中的主成分是磷脂酰胆碱(PC),因此其生理作用也以PC的功能为主。本品为乳白色或淡黄色粉末状或蜡状固体,具有轻微的特臭,触碰时有轻微滑腻感。它在乙醇、乙醚、三氯甲烷或石油醚(沸程40~60℃)中溶解,在丙酮和水中几乎不溶。对热非常敏感,在酸性、碱性和酯酶作用下易水解。对蛋白质、蛋黄过敏者禁用。用于乳化剂、脂质体膜材、食品领域等。据大多数报告,PC能抑制血清甘油三酯总胆固醇,而提高高密度脂蛋白

鉴别
(1)取本品0.1g,置坩埚中,加碳酸钠碳酸钾(2:1)3g,混匀,微火加热,产生的气体能使润湿的红色石蕊试纸变蓝。
(2)取鉴别
(1)项下遗留的残渣约100mg,缓缓灼烧至炭化物全部消失,冷却,加水30ml,微热使残渣溶解,滤过滤液至试管中,滴加硫酸至无气泡产生,再加硫酸4滴,加钼酸钾少许,加热,应呈黄绿色。
生理功能
1.调节血脂。蛋黄卵磷脂能缓解血液凝集而澄清血脂等作用,并能将动脉细胞膜中的饱和脂肪酸代之以不饱和脂肪酸,以避免动脉血管膜的硬化并修复损伤的细胞膜。从而预防动脉硬化心肌梗塞脑溢血等。
2.改善记忆。PC中的胆碱能提高血液和脑中胆碱含量,胆碱是神经传递物质乙酰胆碱的前体,可因之而提高记忆和学习能力。据美国FDA的报告称,PC对迟发性运动功能异常、早老性痴呆症、弗里德赖希氏运动失调症、左旋多巴运动障碍等神经性疾病均有一定效果。为此应使血中能长时间保持高浓度的PC,而蛋黄卵磷脂中高含量的PC可满足这一要求。
3.改善肝炎、脂肪肝等肝脏脂质代谢障碍。PC中的胆碱是使肝脏保持正常功能的必要营养素。如缺乏胆碱1~2周,肝功能就会出现异常,补充PC后即可恢复正常,并能改善醇性肝障碍。这是因为PC能促进脂蛋白的合成和再生,从而保护肝线粒体微粒体溶酶体的膜免受损伤,改善膜的渗透性等作用,以保证肝脏中糖代谢、蛋白质代谢和异废物的排泄等功能。
4.提高耐缺氧能力。作为人体细胞生物膜的主要成分之一的磷脂,是生物膜发挥其功能的基本保证。在肺泡腔内存在着由磷脂和蛋白质复合而成的肺表面活性剂,其中PC占70%,是保证肺换气功能的生理活性物质,缺乏后会使肺泡崩坏,丧失膨胀和收缩功能,而充足的PC是改善肺功能、提高耐缺氧能力的有效物质。
5.蛋黄卵磷脂中含有一定量的花生四烯酸(AA),这是其他磷脂所没有的,因而也具有了AA的各种功能。
检查
【检查】 游离脂肪酸 对照品溶液的制备 称取棕榈酸0.512g,至50ml量瓶中,用正庚烷溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取2ml,至50ml量瓶中,用正庚烷稀释至刻度,摇匀,即得。
供试品溶液的制备 取本品约1g,精密称定,至25ml量瓶中,用异丙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。
测定法 精密量取供试品溶液和对照品溶液各1ml,分别置20ml具塞试管中,各加异丙醇-正庚烷-0.5mol/L硫酸溶液(40:10:1)混合溶液5.0ml,振摇1分钟,放置10分钟。供试品溶液管精密加正庚烷3ml和水3ml,对照品溶液管精密加正庚烷2ml和水4ml,密塞,上下翻转10次,静置至少15分钟,使分层。分别精密量取上层液3ml,置10ml离心管中,加尼罗蓝指示液1ml,在通氮条件下,用氢氧化钠滴定液(0.01mol/L)滴定至溶液显淡紫色。供试品溶液消耗氢氧化钠滴定液(0.01mol/L)的毫升数不得大于对照品溶液消耗氢氧化钠滴定液(0.01mol/L)的毫升数。
水分 取本品,照水分测定法(附录VIII M第一法A)测定,含水分不得过2.0%。
甘油三酸酯胆固醇棕榈酸 取本品适量,用己烷—异丙醇—水(40:50:8)混合溶剂制成每1ml中含20mg的溶液,作为供试品溶液,分别精密称取甘油三酸酯对照品、胆固醇对照品及棕榈酸对照品各适量,用上述混合溶剂分别制成每1ml各含0.6mg、0.2mg、0.2mg的甘油三酸酯对照品溶液,胆固醇对照品及棕榈酸对照品溶液,照薄层色谱法(附录V B)试验,吸取上述供试品溶液,甘油三酸酯对照品溶液,胆固醇对照品溶液各5μl,棕榈酸对照品溶液1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以己烷—乙醚—冰醋酸(70:30:1)为展开剂,置内壁贴有展开剂湿润滤纸的层析缸中,展开后,取出,晾干。喷以硫酸铜溶液,热风吹干,在170℃干燥10分钟,供试品溶液如显现与对照品溶液相应位置的杂质斑点,其颜色与对照品溶液所显的主斑点比较不得更深。(即甘油三酸酯限度为3.0%;胆固醇限度为1.0%;棕榈酸限度为0.2%)。
残留溶剂 内标溶液的制备 取正己烷适量,用正丙醇稀释制成每1ml含0.1mg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品约0.2g,精密称定,置20ml顶空瓶中,精密加入内标溶液 2ml使溶解,密封,即得供试品液。
对照品溶液的的制备 分别精密称取乙醇丙酮适量,用内标溶液稀释制成每1ml中分别含乙醇0.5mg、丙酮0.5mg的混合溶液,精密量取2ml,置20ml顶空瓶中,密封,作为对照品溶液。
测定法 照残留溶剂测定法(附录Ⅷ P)试验。以固定液为100%聚乙二醇毛细管柱为分析柱,柱温30℃;检测器为氢火焰离子化检测器FID),检测器温度为250℃;进样口温度为220℃;载气为氮气氦气,流速为每分钟1ml。顶空进样,顶空瓶平衡温度为80℃,平衡时间为45分钟,进样体积为1ml。各色谱峰之间的分离度应符合要求。含乙醇应不得过0.5%(g/g),含丙酮应不得过0.5%(g/g)。
重金属 取本品2.0g,缓缓灼烧炭化,加硝酸2ml,小心加热至干,加硫酸2ml,加热至完全炭化,在500℃~600℃灼烧至完全灰化,放冷,依法检查(附录VIII H 第二法),含重金属不得过百万分之五。
砷盐 取本品1.0g,置凯氏烧瓶中,加硫酸5ml,用小火消化使炭化,控制温度不超过120℃(必要时可添加硫酸,总量不超过10ml),小心逐滴加入浓过氧化氢溶液,俟反应停止,继续加热,并滴加浓过氧化氢溶液至溶液无色,冷却,加水10ml,蒸发至浓烟发生使除尽过氧化氢,加盐酸5ml与水适量,依法检查(附录Ⅷ J 第一法),应符合规定(不得过0.0002%)。
有关物质 取本品约125mg,精密称定,置25ml量瓶中,用三氯甲烷-甲醇(2:1)溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试溶液。取磷脂酰肌醇溶血磷脂酰乙醇胺鞘磷脂、溶血磷脂酰胆碱对照品适量,用三氯甲烷-甲醇(2:1)溶解制成每1ml含上述对照品分别为20μg、20μg、100μg、100μg的混合溶液,作为对照溶液。照磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺含量测定方法,取对照溶液10μl、20μl、30μl,供试溶液20μl注入液相色谱仪,峰面积和浓度取对数,以三点对数方程法计算,含磷脂酰肌醇不得过1.0%,含溶血磷脂酰乙醇胺不得过0.5%,含鞘磷脂不得过3.0%,含溶血磷脂酰胆碱不得过3.5%。
微生物限度 取本品10g,依法检查(附录Ⅺ J)。每克检出细菌数不得过1000个,霉菌酵母菌数不得过100个,大肠杆菌不得检出。
含量测定
【含量测定】 氮 取本品约0.1g,依法测定(附录Ⅶ D第二法)。含氮(N)应为1.75%~1.95%。
对照品溶液的制备 取105(C干燥至恒重磷酸二氢钾约0.13g),精密称定,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,精密量取10ml置100ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,每1ml中含磷(P)约为30ug。
供试品溶液的制备 取本品约0.1g,精密称定,至坩埚中,加氯仿2ml溶解,加氧化锌2g,蒸去氯仿,缓缓炽灼使样品炭化,然后在600(C炽灼1小时,放冷,加盐酸溶液)1(2)10ml,煮沸5分钟使残渣溶解,转移到100ml量瓶中,加水稀释至刻度。
标准曲线的制备 精密量取对照品0、2、4、6、10ml,分别置25ml量瓶中,依次分别加水10ml,钼酸铵硫酸溶液(取钼酸铵5g,加0.5 mol/L硫酸溶液100ml)1ml,对苯二酚硫酸溶液(取对苯二酚0.5g,加0.25 mol/L硫酸溶液100ml,临用前配制)1ml和50%醋酸钠溶液3ml,并用水稀释至刻度,摇匀,放置5分钟。照分光光度法(附录Ⅶ B),以第一瓶为空白,在720nm的波长处测定吸收度,以测得吸收度与其对应的浓度计算回归方程
测定法 精密量取供试品溶液4ml,置25ml量瓶中,照标准曲线制备项下自“依次分别加水10ml”起同法操作,测得吸收度,由回归方程计算含磷(P)量。含磷(P)应为3.5%~4.1%。
磷脂酰胆碱磷脂酰乙醇胺 照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录ⅤD)测定。
色谱条件与系统适应性试验 用硅胶为填充剂(色谱柱Alltima Sillica,250mm×4.6mm×5μm),柱温为40℃;以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(85:15:0.45:0.05,v/v)为流动相A,以正己烷-异丙醇-流动相A(20:48:32,v/v)为流动相B;流速为每分钟1ml,按下表进行梯度洗脱;检测器为蒸发光散射检测器(参考条件:漂移管温度为72℃;载气流量为每分钟2.0ml)。
磷脂酰乙醇胺磷脂酰肌醇溶血磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱鞘磷脂、溶血磷脂酰胆碱对照品各适量,用三氯甲烷-甲醇(2:1)溶解制成每1ml含上述对照品分别为50μg、100μg、100μg、200μg、200μg、200μg的混合溶液,取上述溶液20μl注入液相色谱仪,各成分按上述顺序依次洗脱,各成分分离度应符合规定,理论板数按磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺峰计算应不低于1500。
标准曲线的制备 称取磷脂酰乙醇胺和磷脂酰胆碱对照品适量,精密称定,用三氯甲烷-甲醇(2:1)溶解,稀释制成每1ml含磷脂酰胆碱50、100、150、200、300、400μg,含磷脂酰乙醇胺5、10、15、20、30、40μg 的溶液作为对照溶液。精密量取上述对照溶液各20μl注入液相色谱仪中,以浓度的对数值为横坐标,峰面积的对数值为纵坐标计算回归方程
供试品溶液的制备 取本品约15mg,精密称定,置50ml量瓶中,加三氯甲烷-甲醇(2:1)溶解并稀释至刻度。
测定方法 取供试溶液20μl注入液相色谱仪中,记录色谱图,由回归方程计算磷脂酰胆碱磷脂酰乙醇胺的含量。含磷脂酰胆碱应大于72.0%,含磷脂酰乙醇胺应不得过10.0%。
【类别】药用辅料,乳化剂、增溶剂
【贮藏】密封、避光,低温(-15℃以下)保存。
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