加德纳杆菌

革兰染色阴性或阳性的短杆菌

加德纳菌( Gardnerella vaginalis, Gv)是一类革兰染色阴性或阳性的短杆菌，厌氧，嗜血，培养困难。Gv是1953年leopold分离出来，1955年证明与女性阴道病有关。Gv是女性细菌性阴道病(bacterialvaginosis,BV )的主要病原菌之一，可经性接触传播，女性Gv感染不仅可以致BV，并可引起输卵管妊娠、胎膜早破和新生儿早产等不良妊娠结局”。

分类命名

早在1953年Leopold自前列腺炎和子宫颈炎标本分离出多形性革兰阴性小杆菌，与嗜血杆菌属相似,但不需要X或V因子。1955年Gardner和Dukes只在血平板中成功地分离出革兰阴性杆菌，并证明该菌与女性阴道病有关因此命名为阴道嗜血杆菌。1980年Grinwood和Pidkett确定该菌为另外一个新菌属并于1984年收录在伯杰氏分类细菌学手册兼性厌氧菌部分，定为加德纳菌属(Garlnerella）阴道加德纳菌(G.raginals,Gv)，为一属一菌。DNA中的G+C含量为(43±1)%，标准菌株为ATCC14018T。模式培养菌株为NCTC10287T。

生物学特征

形态特征

Gv革兰染色阴阳性不定,保存菌趋向阴性，新鲜标本趋向阳性。细菌大小1.5-2.5μmx0.5um。无鞭毛，无荚膜无芽胞。

培养特性

Gv培养要求很高从临床采集的标本应立即接种在含5%人血吐温80双层脑心侵液琼脂(BHT)或5%人血阴道琼脂(V琼脂)及双层人血平板k.培养液中需要生物素叶酸、烟酸硫胺素、核黄素等作为生长时利用。首次分离培养需要在含5%-10%的CO2环境中孵育。最适温度35 ℃-37℃。最适pH6.0-6.5。48h后，菌落大小为0.5mm,灰白色光滑凸起，半透明，有狭窄的β溶血环,而在羊血琼脂中不溶血。

生物学特征

Gv兼性厌氧,氧化酶和触酶均为阴性。发酵葡萄糖、麦芽糖蔗糖等产酸不产气，不发酵肌醇和棉子糖；能水解马尿酸和淀粉,硝酸盐还原试验阴性。Gv能利用亚铁血红蛋白,过氧化氢酶以及含铁复合物中的铁。Gv对干燥抵抗力不强(2-5d死亡),Gv对湿度和温度敏感，煮沸即可达消毒目的。Gv对甲醛、碘酊最敏感，龙胆紫、新洁尔灭、乙醇次之；过氧化塑、过氧乙酸、煤酚皂更次；高锰酸钾无杀菌作用。

致病机制

对于Bv的发病机制至今仍不清楚。考虑有以下因素:阴道内一些细菌或噬菌体裂解对产过氧化氢的乳酸杆菌导致过氧化氢产生减少，从面引起普雷沃菌属(Pevella）动弯杆菌属(Mobiluneus)过度增生产生丁二酸，进而抑制白细胞的趋化作用:普雷沃菌属降解氨基酸产生胺，Gv利用胺来产生氨基酸，这种开高胺浓度和下降乳酸浓度导致BV所特有的阴道pH值升高。动弯杆菌产生三甲胺,即BV的鱼腥味来源:Gv和普雷沃菌属能产生唾液酸酶+唾液酸酶能降解黏液产生均质的阴道分泌物。同时增加细菌对阴道上皮细胞的黏附，面且唾液酸酶可以分解针对Gv溶血素的IgA，使Gv的溶血素得以破坏白细胞，致使BV成为一-种病理上无明显炎症表现的疾病。在常见的阴道疾患中，滴虫生活适宜pH值为5.0-6.6，真菌适宜pH值为4.0-4.7，两者与BV适宜pH值>4.5均有交叉范围,故可以同时存在，混合生长。革兰阴性双球菌(如淋病奈瑟球菌)只感染高颈柱状上皮,不侵犯阴道鳞状上皮,但其引起急性宫颈炎导致脓性分泌物增多,当分泌物流经阴道时可以与BV相关菌群暂时共存。BV患者合并其他感染时导致白细胞大量增加,掩盖Bv本来的特征。任何原因造成的阴道乳酸杆菌的明显下降，均会打乱阴道菌群平衡。在阴道乳酸杆菌不能占优势的情况下，其对阴道的保护作用失效，这时Gv、普雷沃菌属、消化链球菌属、卟琳假单胞菌属、动弯杆菌属等机会致病菌大量繁殖，发展成Bv。

检测方法

标本的收集与处理来自感染妇女的宫颈、尿道或阴道标本，或者可能与上述妇女接触的男性尿道标本。用2支藻酸钙或棉拭子采集分泌物，其中1支拭子直接用于分离培养，另1支用于涂片。

显微镜检查 ①湿片法:可见大量脱落上皮细胞内粘附许多细小杆菌或球杆菌，使上皮细胞呈诺齿状而不清晰这种细胞称线索细胞或克鲁细胞(dhuecell)。②染色法:革兰染色后可见粘附于上皮细胞上的大量细菌为革兰阴性小杆菌或染色不定的球杆菌，阴道正常菌群的革兰阳性大杆菌即乳酸杆菌减少或不见。

胺试验在Gv患者阴道分泌物中滴加100-200g/L的KOH溶液时,可释放出恶臭的鱼腥样气味。

分泌物pH值测定用pH试纸接触阴道壁或沾取分泌物的拭子，结果pH>4.5.

荧光抗体技术 Gv 用特异性黄光抗体在直接涂片上作荧光抗体染色镜检。该法非常准确，阳性率比培养法高。

辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)法按ELEA常规操作，底物用邻苯二胺,用HRP-SPA液代替常规法中第二抗体,当酶标检测仪测得P/N值≥2.1判为阳性。

酶测定法用消毒棉拭子取阴道壁分泌物于1ml消毒Dulbecca缓冲液试管中,参照Schoom -maker法进行醇测定，直接观察结果+黄色表示Gv阳性，无色为阴性。

气相色谱法用气相色谱仪分析Gv患者阴道分泌物中酸碱代谢产物现珀酸盐/乳酸盐比例显著增高。

PCR技术该方法可特异且敏感地检测Gv致病菌株且不受抗生素药物治疗的影响。

分离培养将标本接种分离培养液置35℃、5%CO2环境中孵育48h，用生物梅里埃生产的奈瑟菌属

流行病学

传播方式

GV通过性交传播，其理由是：从细菌性阴道病患者性伴的尿道可分离到该菌；使用避孕套的分离不到。国外调查发现15%的年轻性活跃女性罹患GV感染，患者配偶或性伴侣尿液GV培养阳性率高达79．92%，且生物型相伺。还有报道少数15岁以下健康女孩阴道也存在阴道加特纳菌，表明该菌还能以非性接触方式传播。

检出率

在BV患者与健康无症状妇女中，GV的检出率存在明显差异。据Aroutcheva等报道，BV患者中的检出率为87.5%，处于中间态妇女的检出率为34.0%，而健康妇女的检出率为26.4%。而且在BV的微生物菌群中GV处于优势地位，含量明显高于其他非正常菌群。Vontver等在总结了许多学者的研究结果后发现，有症状妇女检出率为31%～96%，无症状妇女为0～80%。虽然GV可从97%-100%的细菌性阴道病患者中检出，但也可从40%-50%的非细菌性阴道病患者或正常妇女的阴道分泌物中分离出来。

GV是否为男性泌尿生殖道感染，特别是性传播感染(Sex transmitted infection，STI)的病原菌，报道尚不明确。孙蓉等的研究显示76例男性STI患者中有15.8%为GV阳性。且亦有在前列腺炎患者的前列腺液中检出此菌的报道。

临床表现

GV是育龄妇女常见阴道定植的细菌之一，近年来研究发现，它除了可引起细菌性阴道病外，还可导致性交疼痛，引起新生儿败血症、产后败血症、产褥热、尿道感染、不育症、早产、绒毛膜羊膜炎、输卵管炎、子宫内膜炎、子宫颈癌13及肾周脓肿和膀胱炎等。GV可与人型支原体协同作用导致BVH。GV还能明显刺激人类免疫缺陷病毒(HⅣ)在单核一巨噬细胞系统、淋巴细胞中的表达，与HIV的传播率增高有关。此外，GV与沙眼衣原体、解脲支原体等常见病菌双重或多重感染也较多见。

在男性，该菌作为男性尿道炎、前列腺炎的病原菌报道较少。这可能是与男性的泌尿生殖道结构有关。该菌和Mobiluncus在尿道短暂定植。男性尿道炎患者除尿痛、尿频、血尿及尿中白细胞数量增加的尿路感染的症状外，尿中该菌集落形成单位(Colony—forming unit，CFU)可达105/mL或更高。

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