加德纳菌

病症名

加德纳菌性阴道炎又名嗜血杆菌性阴道炎，以前曾归于棒杆菌性阴道炎，是由加德纳杆菌引起的一种阴道粘膜炎症，可通过性交传染。故列为性传播疾病。

介绍

大量研究表明：在性关系混乱的人群中，加德纳菌性阴道炎有高流行率。与患者发生性关系的男性伴侣中，90%的尿道中可发现此菌。加德纳杆菌为革兰氏阴性细小杆菌，常呈球杆状，有时呈丝状和多形状，常见两极染色。宽0.4--0.6微米，长1--2微米大小，无活动力、无鞭毛、无芽孢。许多菌株有荚膜。在人工培养时必须给予新鲜血液才能生长繁殖，故有“嗜血”之称。但其生物特性与嗜血杆菌不尽相同，临床上引起的阴道炎为非特异性阴道炎。

生物特性

营养要求较高，在普通琼脂平板上不生长。多数为兼性厌氧，接种在含5%人血琼脂平板上，3%~5%二氧化碳，35~37℃培养24h，形成针尖大小菌落；48h后菌落直径0.4~0.5mm，呈圆形，不透明，光滑。在人血和兔血琼脂培养基上形成β-溶血环。甲哨唑(50μg/片)抑菌试验阳性。

阴道加德纳菌触酶阴性，大多数菌株分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖产酸，不发酵甘露醇、棉籽糖和肌醇，赖氨酸、鸟氨酸和精氨酸脱羧酶阴性，V-P、靛基质、明胶液化、硝酸盐还原和硫化氢均阴性。水解马尿酸钠。

症状

加德纳杆菌引起的感染多数较轻，多见于性活跃妇女。急性期白带增多，有鱼腥或氨的臭味，外阴潮湿不适，常伴有阴道灼热感、性交痛及外阴骚痒。检查见部分患者外阴红肿，阴道粘膜充血，呈灰红色，轻度红肿，分泌物多呈均质性，稀薄，灰白色，有时为乳黄色或类绿色，腥臭味。阴道pH常为5--5.5。有时白带量少，仅有薄薄一层，如膜样覆盖在充血的阴道壁上。少数患者阴道壁有红斑或淤点，孕妇患者可引起流产或产后子宫内膜炎。感染重者也可导致败血症、尿道感染、肾周脓肿和膀胱炎等。

根据临床表现，阴道分泌物涂片或培养确诊。尤其能查到特征性线索细胞，诊断不难。

鉴别诊断应包括所有的淋菌性、真菌性、滴虫性阴道炎。

检验方法

材料和方法

1、临床标本：宫颈分泌物，取自医院门诊妇产科就诊的非特异性阴道炎(NSV)患者，常规消毒用无菌棉签自宫颈口取分泌物于无菌生理盐水管中。

2、革兰染色法：取无菌生理盐水中的宫颈或阴道分泌物直接涂片，常规革兰染色，找到线索细胞者为阳性。

3、吖啶橙染色荧光法：取无菌生理盐水中的宫颈或阴道分泌物直接涂片，自然干燥，火焰固定，0.1 mmol/L吖啶橙染色37℃30 min，用0.01 mol/L PBS冲洗2次，0.01 mmol/L 氯化钙分色1 min，用0.01 mol/L PBS缓冲液冲洗1次，甘油封片，荧光显微镜观察结果。在上皮细胞中发现成堆桔黄色细小杆菌为阳性。

4、分离培养鉴定法：将无菌生理盐水中的阴道或宫颈分泌物，以无菌手续接种于阴道加德纳菌专用分离培养基上，置5%二氧化碳培养箱37℃孵育48 h，挑取灰色、半透明、光滑、露滴状样菌落，如为革兰染色阴性小杆菌者，进行生化鉴定，生化鉴定标准按文献进行鉴定。

5、PCR检测法：(1)根据Belkum等报道加德纳菌位于IIS-23srRNA基因区为特异性引物序列，扩增片段：433bp。引物15′-TTTCGTGGAGGGTTCGATTCTGG-3′引物2 5′-TACA-AGCTGATAGGACGCG-3′由上海生物工程公司合成。(2)临床标本模板DNA的制备：将宫颈分泌物500μl生理盐水中，12 000 r/min离心10 min，弃上清液，加碱性裂解液，98℃10 min，12 000 r/min离心5 min，取上清液做模板。(3)PCR扩增和产物检测：反应总体积为25μl，包括10×PCR缓冲液2.5 μl，4×dNTP 1.5 μl，引物1，2各0.25 μl，无菌去离子水9.5μl，模板10 μl，Taq DNA聚合酶1 U/μl，以无菌石蜡油30 μl覆盖，进入PCR循环，循环参数为:95℃5 min，94℃ 1 min，58℃ 1 min，72℃ 1 min，32个循环，最后72℃延伸5 min。取扩增产物15 μl，于2%琼脂糖(含EB液)上100 V电泳30 min，于紫外光下观察结果，出现433 bp扩增带者为阳性，未见433 bp扩增带为阴性。

讨论

1、革兰染色找线索细胞仍是一种诊断细菌性阴道病的常规方法。

异染性染料，吖啶橙以插入方式与病原体双螺旋DNA分子结合，根据病原体DNA或RNA对吖啶橙染料的吸附方式不同所放射的荧光也不同，再加上加德纳菌在侵袭的靶目标为上皮细胞聚集，当吖啶橙染色后在荧光照射下，发射出桔红色荧光，能清晰地检测出加德纳菌在上皮细胞上的聚集现象，作出精确的诊断。

3、分离培养鉴定法是国际确认的金指标，临床上由于不正规的应用抗生素，导致许多病原体在一定程度上受到抑制，给分离培养带来困难，造成分离培养阴性结果，建议做分离培养应取材于治疗前的标本，需要专用的高营养的培养基，以提高分离培养的阳性检出率。

4、PCR技术具有高度的特异性和敏感性，选用特异的寡核苷酸引物序列，检测目的是病原体的遗传物质DNA不受抗生素治疗等药物治疗的影响，对彻底根治病原体有着极其重要的意义。

一般治疗

1）磺胺类药物和四环素族药物

将四环素100毫克和磺胺噻唑0.5克制成栓剂，置入阴道深部，每晚一次，共10日。

2）灭滴灵

每次250毫克，1日3次，共7日。或大剂量2克，一次口服。大剂量可能引起恶心、呕吐。

3）氨苄青霉素

口服500毫克，一天4次，共7日。有全身感染者，可静脉滴注氨苄青霉素或氯霉素。