志贺菌属

痢疾杆菌

志贺菌属是人类细菌性痢疾最常见的病原菌,通称痢疾杆菌。根据生化反应与血清学试验该属细菌分为痢疾福氏、鲍氏和宋内志贺菌四群。培养特性是需氧或兼性厌氧液体培养基中呈浑浊生长,在普通琼脂平板和SS培养基上形成直径2mm左右的中等大小、半透明的光滑型菌落宋内志贺菌可形成扁平、粗糙的菌落

简介
志贺菌属( Shigella)细菌是人类细菌性瘌疾的病原菌,通称痢疾杆菌( dysentery bacterium)。灵长类动物亦是其天然宿主。细菌性痢疾主要流行于发展中国家,是一种常见病,全世界年病例数超过2亿,年死亡病例数达65万。本属细菌包括志贺痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌、鲍氏痢疾杆菌和疾杆菌4个群、47个血清型。
CDC分类系统(1989)将生化性状相近的A、B、C群归为一群,统称为A、B、C血清群,将鸟氨酸脱羧酶和β-半乳糖苷酶均阳性的宋内志贺菌单列出来。
我国以福氏和宋内志贺菌引起的菌痢最为常见。 细菌性痢疾是一种常见病,主要流行于发展中国家,全世界年病例数超过2亿,其中500万例需住院治疗,年死亡病例达65万。志贺菌属还可感染除人类以外的其他灵长类,偶尔感染畜禽,可引起肉品等污染。
生物学特性
大小为0.5-0.7μmx2-3μm,无荚膜,无鞭毛,不形成芽胞,某些菌株有菌毛。在选择培养基上形成较小的半透明无色菌落。本属菌生化反应能力较其他肠道杆菌为弱。分解葡萄糖一般不产气。不分解尿素,不形成硫化氢,不能利用枸橼酸盐作为碳源。多数志贺菌不分解乳糖,但宋内志贺菌能迟缓发酵乳糖。
本属菌有O抗原和K抗原,无H抗原。O抗原是分类的依据,K抗原可阻止O抗原与相应O抗体发生凝集,加热后可消除此种阻抑作用。根据志贺菌O抗原构造的不同,可分为四群、39个血清型。我国以福氏痢疾杆菌多见,其次是宋内痢疾杆菌。
抗原结构
志贺菌属主要有菌体抗原O抗原)而无鞭毛抗原H抗原),个别菌型及新分离菌株有K抗原。O抗原是分类的依据,分群特异抗原和型特异抗原,借此将志贺菌属分为4群(种)40余血清型(包括亚型)。K抗原在分类上无意义,但可阻止O抗原与O抗体的结合。从生物化学特性看,除A群外,B、C、D群志贺菌均能发酵甘露醇;除D群外,A、B、C群志贺菌均无鸟氨酸脱羧酶。
A群:即痢疾志贺菌。有10个血清型,其中8型尚可分3个亚型。是惟一不能发酵甘露醇的一群志贺菌。
B群:即福氏志贺菌。有13个血清型(包括变型和亚型),各型间有交叉反应
C群:即鲍氏志贺菌。有18个血清型。
D群:即宋内志贺菌。抗原单一,只有一个血清型。是惟一具有鸟氨酸脱羧酶的一群志贺菌,宋内志贺菌有I相和II相两个交叉变异相。I相呈S型菌落,对小鼠有致病力,多自急性期感染病人标本中分离得。II相为R型菌落,对小鼠不致病,常从慢性患者或带菌者检出。
志贺菌的抵抗力比其他肠道杆菌弱,加热60℃10min可被杀死。对酸和一般消毒剂敏感。在各群志贺菌中,以宋内志贺菌抵抗力最强。在粪便中,由于其他肠道菌产酸或噬菌体的作用常使本菌在数小时内死亡,故粪便标本应迅速送检。但在污染物品及瓜果、蔬菜上,志贺菌可存活10-20d。在适宜的温度下,可在水及食品中繁殖,引起水源或食物型的暴发流行。由于磺胺及抗生素的广泛应用,志贺菌的多重耐药性的问题日趋严重,给临床治疗带来一定困难。
生化反应
注1:
+:90%~100%阳性;
-:0%~10%阴性;
+/-:大多数菌株阳性,少数阴性;
-/+:大多数菌株阴性,少数阳性;
V:种间有不同反应;
注2:
TSI(三糖铁培养基)上反应情况:斜面;底层/产气;硫化氢
A=产酸(黄色),K=产碱(红色),+为阳性,-为阴性。
致病性
致病物质
侵袭力菌毛粘附于肠黏膜上皮细胞,诱导细胞内吞。
内毒素:破坏肠黏膜;肠壁通透性;肠壁植物神经——腹痛,腹泻,里急后重,粘液脓血便
外毒素(志贺毒素,ST):肠毒素活性;细胞毒活性;神经毒活性。
所致疾病
细菌性痢疾,简称菌痢。可分为急性菌痢中毒性菌痢慢性菌痢传染源为病人和带菌者,经粪口传播。
微生物学检验
标本采集
尽可能在发病早期及治疗前采集新鲜粪便,选择脓血便粘液便,必要时可用肛拭子采集。
生化鉴定
检查麦康凯琼脂平板,志贺氏菌的菌落为浅粉红色,半透明,将此可疑菌落接种于下列培养基中:葡萄糖肉汤,TSI琼脂斜面,赖氨酸脱羧酶肉汤,动力试验琼脂和胰胨。置35℃培养48h,但应在20h进行检查,弃去所有有动力、产H2S、产气、赖氨酸脱羧以及发酵蔗糖与乳糖的培养物。关于产生吲哚者,应弃去其44℃增菌物中的阳性培养物。至于42℃增菌培养中的所有可疑培养物皆有可能是阳性或是阴性,因此皆应予保留。
血清凝集法
志贺氏菌有 K和O抗原而无H抗原。K抗原是自患者新分离的某些菌株的菌体表面抗原,不耐热,加热100℃1小时被破坏。K抗原在血清学分型上无意义,但可阻止O抗原与相应抗血清凝集反应。根据志贺氏菌抗原构造的不同,可分为四群48个血清型(包括亚型)。
(1)A群:又称痢疾志贺氏菌(Sh.dysenteriae),通称志贺氏痢疾杆菌。不发酵甘露醇。有12个血清型,其中8型又分为三个亚型。
(2)B群:又称福氏志贺氏菌(Sh.flexneri),通称福氏痢疾杆菌。发酵甘露醇。有15个血清型(含亚型及变种),抗原构造复杂,有群抗原和型抗原。根据型抗原的不同,分为6型,又根据群抗原的不同将型分为亚型;X、Y变种没有特异性抗原,仅有不同的群抗原。
(3)C群:又称鲍氏志贺氏菌(Sh.boydii),通称鲍氏痢疾杆菌。发酵甘露醇,有18个血清型,各型间无交叉反应
(4)D群:又称宋内氏志贺氏菌(Sh.sonnei),通称宋内氏痢疾杆菌。发酵甘露醇,并迟缓发酵乳糖,一般需要3~4天。只有一个血清型。有两个变异相,即Ⅰ相和Ⅱ相;Ⅰ相为S型,Ⅱ相为R型。
取粪便(粘液或脓血部分)或肛拭标本接种GN肉汤增菌,增菌后进行分离培养。一般同时接种强弱选择性不同的两个平板。强选择鉴别培养基可用沙门、志贺菌选择培养基(SS);若选择诊断血清可选择天津生物芯片福氏志贺式多价诊断血清可疑菌落进行鉴定。
挑选可疑菌落3~4个先用志贺菌属多价诊断血清作试探性玻片凝集试验。将试探性凝集试验阳性的菌落至少接种2~3支KIA和MIU,经35 ℃培养18~24h,凡符合;KIA:K/A、产气-/+、H2S-;MIU:动力-、吲哚+/-、尿酶-,并结合试探性玻片凝集试验阳性结果可鉴定为志贺菌属。
核酸扩增法
核酸扩增技术,即聚合酶链式反应(polymerase chainreaction,PCR),其基本原理是设计、合成两条寡核苷酸,作为引物,对应于待测病原微生物某一段特异性序列的两端,然后在体外模拟DNA体内复制的过程反复扩增,使靶序列放大上万倍甚至上百万倍而被检测出来。
鉴别
类志贺邻单胞菌和伤寒沙门菌的鉴别:可用动力和氧化酶试验加以鉴别,志贺菌均为阴性,而类志贺邻单胞菌为阳性。伤寒沙门菌硫化氢和动力阳性,能与沙门菌属因子血清(0多价A-F群或Vi)凝集而不与志贺菌属因子血清凝集。
防治原则
人工主动免疫用于预防的效果尚不理想,治疗细菌性痢疾一般首选氟喹诺酮类抗生素。
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