抗体效价

生物学名词

抗体效价是生物学名词，是用抗体的物理状态及其在体内的滞留时间，以其与抗原反应的多少来表示其免疫效果的一种反应。

检测方法

多采免疫双向扩散法

【基本原理】

*指抗原和抗体在同一凝胶内都扩散，彼此相遇后形成特异性的沉淀线。

-将抗原与抗体分别加入同一凝胶板中两个相隔一定间距的小孔内，使两者进行相互扩散，当抗原抗体浓度之比相适宜时，彼此相遇形成一白色弧状沉淀线。

*优缺点：简便，但敏感性较低，易出现假阴性结果。

免疫双向扩散法的操作步骤

*将玻璃板用水洗净后用75%乙醇冲洗，晾干后放在水平台上备用。

*将1%agar 融化后，置56℃水浴。

*在玻璃板上铺胶，约1.5mm 厚，凝固后打孔(直径 3rnm)，孔间距10mm。

l 抗血清(抗体预先作系列倍比稀释即ml 抗原样品，周围孔内每孔加5m*中心孔加5 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32等比例)。

*凝胶板置湿盒内，室温扩散24h。

*观察结果。

凝聚胺法测定孕妇血清IgG抗-A（抗-B）效价的方法　待检血清与0.2 mol/L 2?硫基乙醇(2?Me)在试管内等量混合，放入37℃水浴1 h以破坏血清中的IgM抗体，吸取处理后的血清用生理盐水倍比稀释，稀释度分别为2、4、8、16、32、64、128、256、512、1 024，然后每管加入相应的3%～5%红细胞悬液，置37℃水浴30 min，观察是否凝集，不凝集者用生理盐水洗涤3次，然后加入低离子盐水介质(LIM液)，混匀，滴入2滴凝聚胺，混匀后3 000 r/min离心30 s，扣摇肉眼可见明显的凝集(无凝集者须重做)，再加入2滴重悬液，轻摇，观察凝集是否消失，凝集1 min内不消失者表示受检者血清中含有IgG型抗-A(抗-B)。

抗体效价检测的其它方法

*环状沉淀试验，需较多的抗血清，现已很少用；

*对流免疫电泳，比琼脂免疫双扩散法敏感，较简便、实用；

*酶联免疫吸附试验 (ELISA)。

通常抗体效价低于1：128是没有问题的，有些孕妇高达1：256以上，而且抗体效价最好1个月查上一次，有时候会有所变化。

有关疾病

母儿血型不合溶血病

新生儿溶血病是孕妇和胎儿之间血型不合而产生的同族血型免疫疾病，可发病于胎儿和新生儿的早期。当胎儿从父方遗传下来的显性抗原恰为母亲所缺少时，通过妊娠、分娩，此抗原可进入母体，刺激母体产生免疫抗体。当此抗体又通过胎盘进入胎儿的血循环时，可使其红细胞凝集破坏，引起胎儿或新生儿的免疫性溶血症。这对孕妇无影响，但病儿可因严重贫血、心衰而死亡，或因大量胆红素渗入脑细胞引起核黄疸而死亡，即使幸存，其神经细胞和智力发育以及运动功能等，都将受到影响。

母儿血型不合，主要有ABO和Rh型两大类，其他如MN系统也可引起本病，但极少见。ABO血型不合较多见，病情多较轻，易被忽视。Rh血型不合在我国少见，但病情严重，常致胎死宫内或引起新生儿核黄疸。

一、病因

ABO血型系统中，孕妇多为O型，父亲及胎儿则为A、B或AB型。胎儿的A、B抗原即为致敏源。Rh血型中有6个抗原，分别为C、c、D、d、E、e，其中以D抗原性较强。致溶血率最高，故临床上以抗D血清来检验。当母亲或新生儿红细胞与已知的抗D血清发生凝集，即为Rh阳性，反之则为阴性。Rh阴性的孕妇，偶亦可被其他抗原致敏而产生抗体，如抗E抗C抗体等，从而发生母儿血型不合。

胎儿红细胞正常不能通过胎盘，仅在妊娠或分娩胎盘有破损时，绒毛血管内胎儿红细胞才能进入母体，并根据进入的量、致敏次数，影响到抗体产生的多少及最后引起胎婴儿溶血的轻重等。

血型抗体是一种免疫球蛋白，有IgG、IgM两种。IgG分子量小（7S－r球蛋白），为不完全抗体（胶体介质抗体或遮断性抗体），能通过胎盘；而IgM分子量大（19S－γ球蛋白），为完全抗体（盐水凝集抗体），不能通过胎盘。Rh、ABO血型抗体能通过胎盘起作用的是IgG。

二、病理及临床表现

（一）因红细胞破坏增加，网状内皮系统及肝、肾细胞可有含铁血黄素沉着。

（二）骨髓及髓外造血组织呈代偿性增生，肝脾肿大，镜检在肝、脾、肺、胰、肾等组织内可见散在髓外造血灶。

（三）贫血导致心脏扩大，血浆蛋白低下、全身苍白、水肿、胸腹及心包等组织内可同凶散在髓外造血灶。

（四）高胆红素血症可引起全身性黄疸及核黄疸。核黄疸多发生在基底核、海马钩回及苍白球、视丘下核、尾状核、齿状核等处。神经细胞变性，胞浆黄染，核消失。

轻症者多无特殊症状，溶血严重者，可出现胎儿水肿、流产、早产甚至死胎。娩出后主要表现为贫血、水肿、肝脾肿大、黄疸及核黄疸。症状的轻重取决于抗体的多少、新生儿成熟度及代偿性造血能力等。

三、诊断

主要依靠实验室的特异性抗体检查。凡既往有流产、不明原因的死胎、输血史或有新生儿重症黄疸史者，均应除外母儿血型不合可能。

孕妇产前应常规查血型，如为O型，而其夫为A、B、AB型者应作特异性抗体检查，阴性者提示已被致敏，Rh血型不合抗体效价＞1:32，ABO血型不合抗体效价＞1:512者提示病情严重。

有条件时可行羊水检查，利用分光光度计，作羊水胆红素吸光度分析，于450mμ处吸光度差（△ O D450）＞0.06为危险值；0.03～0.06警戒值；＜0.03为安全值。孕36周以后，羊水胆红素含量0.03＞0.06mg%为正常值；＞0.2mg%提示胎儿有溶血损害。

四、处理

（一）孕期处理

1．综合疗法

为提高胎儿抵抗力及胆红素代谢能力，于孕24周、30周、33周各进行10天综合治疗，方法如下：每日静注50%葡萄糖40mg加维生素C100mg；吸氧，每日2～3次，每次15～20分钟维生素E30mg，每日3次。必须时可延长治疗时间及增加疗程。约产前2周，每日口服苯巴比妥10～30mg，每日2～3次，可增强胎肝细胞葡萄糖醛酸转移酶的活性，加强胆红素代谢，以减少核黄疸发生机会。

2．中药

茵陈蒿汤（茵陈9g、制大黄4.5g、黄芩9g、甘草6g）每日一剂煎服，至分娩。

3．引产

妊娠36周以后，遇下列情况可考虑引产：①抗体效价：Rh血型不合抗体效价＞1:32，ABO血型不合抗体效价＞1:512；②有过死胎史，尤其因溶血病致死者；③胎动、胎心率有改变，提示继续妊娠对胎儿已不安全；④羊水呈深黄色或胆红素含量升高。

（二）产时处理

争取自然分娩，避免使用镇静、麻醉剂，以免增加胎婴儿窒息机会。做好新生儿抢救准备。娩出后立即断脐，以减少进入儿体内的抗体，并留脐带约10cm长，以备注药或必要时换血用。胎儿出生后，立即从脐静脉注入25%葡萄糖10ml、维生素C100mg、尼可刹米125mg及/或氢化可的松25mg。另留胎盘侧脐血送检血型、胆红素、特殊抗体测定及红细胞、血红蛋白和有核红细胞检查等。

（三）新生儿处理

注意三个关键时间：1、初生1～2天，轻症者注意黄疸出现时间，加重速度和程度。若出生时贫血严重，脐血血红蛋白＜12g%者，应考虑输血；2、2～7天，重点是针对并防止因高胆红素血症可能引起的核黄疸，应严密监视血清间接胆红素升高的程度和速度，勿使超过发生核黄疸的临界浓度（18～20mg%）；3、产后2个月内，注意红细胞再生功能障碍所致的贫血，必要时输血。

对小儿智力的影响

新生儿溶血病通常是指母子血型不合，由血型抗原免疫后引起的同族免疫性溶血性疾病。包括ABO血型不合和Rh血型不合引起的溶血病。在我国ABO血型不合引起的溶血病发病较多，Rh 血型不合引起的溶血病发病较少。ABO血型不合以母亲血型为“O”型，小儿血型为“A”型者最多见，“B”型者次之，ABO溶血病大多第一胎就发病。Rh血型不合病儿的母亲为Rh阴性血，小儿为Rh阳性血，很少第一胎发病，如母亲有输血史，小儿可第一胎发病。

新生儿溶血病的症状轻重差异很大。一般来说Rh血型不合者症状重，ABO血型不合大多症状较轻，少数症状重。溶血严重者出生时已有严重贫血，全身水肿，可发生心力衰竭，有的甚至为死胎。小儿常在出生后第1天或第2天出现黄疸，迅速加重，黄疸出现越早，发展越快，病情越重。ABO溶血病儿多为轻度贫血，Rh溶血的小儿贫血严重，可导致心力衰竭。大多数病儿除黄疸、轻度贫血外无其他表现，严重者有吃奶减少、嗜睡。小儿还有肝、脾脏肿大。如果溶血较重，血中胆红素浓度达到340μmol/L以上，可能发生核黄疸。

如果小儿黄疸出现早，很快加深，由于新生儿血脑屏障功能差，血中胆红素高达340μmol /L以上时，就会发生核黄疸(即胆红素脑病)，损害中枢神经系统，幸存的小儿留有脑性瘫痪和智力发育障碍等后遗症。如果母亲过去有不明原因的流产、早产、死胎，或上一胎有新生儿重症黄疸，或确诊为新生儿溶血病者，应警惕本次妊娠有母子血型不合可能，要做好产前检查。如果母亲为“O”型或Rh阴性血，应在怀孕28、32、36周分别到医院检查抗体和抗体浓度，如果抗体为阳性，抗体浓度高则小儿发生溶血病的可能性极大，可给母亲服用退黄中药，生产前1～2周加服苯巴比妥可减轻新生儿黄疸。

发生新生儿溶血病，特别是Rh溶血可能性极大的产妇，如果腹围过度增大，体重增加超过正常，在怀孕35周以后应到医院检查羊水，如果羊水中胆红素浓度含量较高，其他检查说明胎儿肺脏发育成熟时，可在35～38时引产，存活率较高。生产时应做好抢救准备，防止小儿发生新生儿窒息，胎儿出生后尽早结扎挤带，可减轻黄疸。出生时或出生后12小时内有严重贫血、全身水肿和心力衰竭的病儿应立即给氧、利尿、强心治疗，情况稳定后尽快换血。一般小儿使用蓝光照射，用加速胆红素代谢和排泄的药物，例如苯巴比妥、激素、中药、白蛋白或血浆等可使小儿黄疸逐渐减轻。如果血中胆红素超过340μmol/L时应给小儿换血，防止引起胆红素脑病。